لتستلقي على الكائنات الحية القابلة للطي للبكتيريا. رؤية الوسط الحي. تطبيق وسائط التشخيص التفاضلي
البحوث الميكروبيولوجية - مراقبة الثقافات النقية للكائنات الحية الدقيقة وزراعتها وزراعتها. تسمى الثقافات نقية إذا كانت كائنات دقيقة من نفس النوع. إن الرائحة الكريهة ضرورية في تشخيص الأمراض المعدية ، وتحديد الأنواع والانتماء النموذجي للميكروبات ، في الروبوتات التالية ، والقضاء على منتجات حياة الميكروبات (السموم ، والمضادات الحيوية ، واللقاحات ، وما إلى ذلك).
لزراعة الكائنات الحية الدقيقة (الزراعة في العقول المجزأة في المختبر) ، تعتبر ركائز خاصة ضرورية - وسيلة منح الحياة. في وسط الكائنات الحية الدقيقة ، يتم تنفيذ جميع عمليات الحياة (العيش ، الموت ، التكاثر بشكل رقيق) ، لذلك يطلق عليهم أيضًا الوسطاء للزراعة.
العيش في المنتصف
تعد حياة الوسيط أساس العمل الميكروبيولوجي ، والذي يشير غالبًا إلى نتائج جميع الأبحاث. الجزء الأوسط من الشعور بالذنب هو صنع الغسل الأمثل (الأفضل) لحياة الميكروبات.
فيموجي إلى المنتصف
الوسطاء مسؤولون عن مثل هذه الإجراءات:
1) كن على قيد الحياة ، بحيث يمكنك أن تأخذ من الشخص الذي يسهل غزو كل خطبه ، إشباعًا ضروريًا لاحتياجاته من الطعام والطاقة. هم مصدر المواد العضوية والخطابات المعدنية (غير العضوية) ، بما في ذلك العناصر الدقيقة. لا يتم تضمين الكلام المعدني فقط في بنية البظر وينشط الإنزيمات ، ولكنه يحدد أيضًا القوة الفيزيائية والكيميائية للوسائط (الضغط الاسموزي ، ودرجة الحموضة ، وداخل.). عند زراعة كائنات دقيقة منخفضة في الوسط ، أضف عوامل النمو - الفيتامينات ، والأحماض الأمينية النشطة ، مثل الكليتين ، التي يستحيل تصنيعها ؛
احترام! الكائنات الحية الدقيقة ، مثل جميع الكائنات الحية ، تتطلب كمية كبيرة من الماء.
2) التركيز الأمثل لأيونات الماء للأمهات - الرقم الهيدروجيني ، لأنه فقط مع التفاعل الأمثل للوسط ، والذي يساهم في تغلغل القشرة ، يمكن للكائنات الحية الدقيقة التغلب على حياة الكلام.
بالنسبة لعدد كبير من البكتيريا المسببة للأمراض ، يكون وسط التجويف الضعيف هو الأمثل (الرقم الهيدروجيني 7.2-7.4). Vignatok لتصبح ضمة الكوليرا - تم العثور على أفضلها في منطقة البركة (درجة الحموضة 8.5-9.0) وهزاز السل ، الأمر الذي يتطلب تفاعلًا حمضيًا قليلاً (الرقم الهيدروجيني 6.2-6.8).
سوب وقت نمو الكائنات الحية الدقيقة في المنتجات الحمضية أو البرك من حياتها لم يغير الرقم الهيدروجيني ، الوسيط مسؤول عن التخزين المؤقت ، بحيث يمكن الانتقام من الكلام ، بحيث يتم تحييد المنتجات ؛ تبادل؛
3) تكون متساوية التوتر للخلايا الميكروبية ؛ لذلك يمكن أن تكون القبضة التناضحية للوسط مماثلة لمنتصف الخلايا. بالنسبة لعدد كبير من الكائنات الحية الدقيقة ، يكون الوسط الأوسط هو الأمثل ، والذي يحتوي على فرق 0.5 ٪ لكلوريد الصوديوم ؛
4) أن تكون معقمة ، شظايا ميكروبات الطرف الثالث تغير نمو الميكروب الموجود ، مما يدل على قوته ويغير قوة الوسط (المستودع ، درجة الحموضة ، إلخ) ؛
5) البرامج الوسيطة الرئيسية بسبب علم الزرع والاتساق الأمثل للكائنات الحية الدقيقة ؛
6) الأم pevny okislyuvalno-vydnovny المحتملة ، أن spіvvіdnoshnja rechovins ، scho لإعطاء واستقبال الإلكترونات ، والتي يتم التعبير عنها بواسطة مؤشر RH 2. هذا الجهد يدل على الزيادة في منتصف الحموضة. بالنسبة لبعض الكائنات الحية الدقيقة ، فإن الإمكانات العالية المطلوبة ، بالنسبة للآخرين - منخفضة. على سبيل المثال ، تتكاثر اللاهوائية عند RH 2 ليس أعلى من 5 ، والأيروبس - عند RH 2 لا تقل عن 10.
7) أن تكون موحدة قدر الإمكان وذلك لزيادة كمية المكونات الأخرى. وبالتالي ، فإن الوسيط الخاص بزراعة المزيد من البكتيريا المسببة للأمراض مسؤول عن 0.8-1.2 جم / لتر من النيتروجين الأميني NH 2 إلى إجمالي النيتروجين للمجموعات الأمينية من الأحماض الأمينية والبولي ببتيدات السفلية ؛ 2.5-3.0 جم / لتر من نيتروجين النيتروجين ؛ 0.5 ٪ من الكلوريدات في بيريراهونكا لكلوريد الصوديوم ؛ 1٪ ببتون.
Bazhano ، بحيث كانت البيئات واضحة الرؤية - من الأفضل متابعة نمو الثقافات ، فمن الأسهل تذكر انحراف الكائنات الحية الدقيقة عن البيئة.
تصنيف الوسط
إن الحاجة إلى الخطب الحية وقوة الوسط في أنواع مختلفة من الكائنات الحية الدقيقة ليست هي نفسها. تسي خلق لا يمكن وقفه للوسط العالمي. بالإضافة إلى ذلك ، عند اختيار تشي الوسط ، أضف عدد الإنجازات.
في هذه الساعة ، تم الترويج لعظمة عدد الوسائط ؛ تم وضع مثل هذه العلامات كأساس لتصنيفها.
1. المكونات الخارجية. بواسطة مكونات vihіdnim تميز بين الوسائط الطبيعية والاصطناعية. يتم تحضير الوسائط الطبيعية من منتجات النباتات والنباتات. في الدنمارك؛ ساعة من تعفن الوسط ، في بعض أصناف منتجات اليرقة (اللحوم وغيرها) يتم استبدالها بمنتجات غير محصودة: البورشني الكيسي والريبني ، ورذاذ العلف ، والجلطات الدموية والزعنفة. بصرف النظر عن حقيقة أن مستودع الوسطيات الحية من المنتجات الطبيعية قابل للطي أيضًا والتغيرات في الفوضى في شكل syrovin البري. يتم تحضير الوسائط الاصطناعية من مركبات عضوية وغير عضوية نقية كيميائياً ، مأخوذة من التركيزات المحددة بدقة والاختلافات في اثنين من المياه المقطرة. تعد أولوية هذه الوسطاء مهمة بالنسبة لأولئك الذين لديهم مستودع دائم (على ما يبدو ، يتم تضمين خطابات skіlki و yakі فيها) ، بحيث يسهل إنشاء هذه الوسطاء.
2. التناسق(ستوبين شلنوستو). الوسطاء هم rіdkі و schіlnі و napіvіrіdki. يتم تحضير هذه الأدوات الوسيطة من الأنواع النادرة ، حتى يتم إضافتها لإضافة أجار أجار أو الجيلاتين إلى منتصف القوام المطلوب.
Agar-agar هو عديد السكاريد ، مأخوذ من مجموعة متنوعة من الأعشاب البحرية. Vіn є للكائنات الحية الدقيقة مع الكلام الحي ولا يخدم إلا لتقوية الوسط. في الماء ، يذوب أجار عند 80-100 درجة مئوية ، ويذوب عند 40-45 درجة مئوية.
الجيلاتين هو بروتين رحلة المخلوق. عند 25-30 درجة مئوية ، تذوب الوسائط الجيلاتينية ، لذلك سوف تهتز الثقافات الموجودة عليها في درجة حرارة الغرفة. يتغير سمك هذه الوسائط عند درجة حموضة أقل من 60 وأعلى من 70 ويتم تجاوز الرائحة الكريهة بشكل سيئ. نشط الكائنات الحية الدقيقة نيابة الجيلاتين مثل الكلام الواهب للحياة - لنمو يرتفع المتوسط.
بالإضافة إلى ذلك ، كقلب متوسط ، يحرق مصل الدم المحترق ، يحرق البيض والبطاطس والوسط بهلام السيليكا.
3. مخزون. الأجزاء الوسطى مقسمة إلى بسيطة وقابلة للطي. تمت إضافة مرق ببتون اللحم (MPB) ، أجار ببتون اللحم (MPA) ، مرق وأجار هوتينجر ، الجيلاتين الحي وماء الببتون إلى الأول. يتم تحضير الوسطيات القابلة للطي ، وإضافة الدم إلى الوسطيات البسيطة ، والسيروفاتكا ، والكربوهيدرات والكلام الآخر ، والتكاثر الضروري لهذه الكائنات الحية الدقيقة الأخرى.
4. ميعاد: أ) تعمل الوسائط الرئيسية (نصف الحية) على زراعة المزيد من البكتيريا المسببة للأمراض. تسي vishchezgadani MPA ، MPB ، مرق وأجار Hottinger ، ماء الببتون ؛
ب) تعمل الوسائط الخاصة على رؤية الكائنات الحية الدقيقة وتنميتها ، مثل النمو على وسائط بسيطة. على سبيل المثال ، لزراعة المكورات العقدية ، أضف tsukor إلى الوسطاء ، من أجل المكورات السحائية المكورات الرئوية - مصل الدم ، للسعال - الدم ؛
ج) تعمل الوسائط الانتقائية (الانتقائية) على رؤية نوع الميكروبات الغنائي ، ونمو هذه الرائحة الكريهة إلى التشبع ، وخنق نمو الكائنات الحية الدقيقة المصاحبة. وهكذا ، فإن أملاح أحماض zhovchnyh ، التي تؤدي إلى تفاقم نمو القولونية المعوية ، تجعل الوسيط انتقائيًا للعامل المسبب لحمى التيفوئيد. يصبح الوسط انتقائيًا عند إضافته إلى غناء المضادات الحيوية والأملاح وتغيير درجة الحموضة.
تسمى بعض الوسائط الاختيارية وسائط التراكم. بعقب هذا الوسط هو ماء الببتون برقم هيدروجيني 8.0. عند هذا الرقم الهيدروجيني ، تتكاثر ضمات الكوليرا بنشاط عليها ، ولا تنمو الكائنات الحية الدقيقة الأخرى ؛
د) تسمح وسائط التشخيص التفاضلي بتمييز (تمييز) نوع واحد من الميكروبات مع نشاط إنزيمي آخر ، على سبيل المثال ، وسط Hiss بالكربوهيدرات ومؤشر. مع نمو الكائنات الحية الدقيقة ، التي تنقسم إلى كربوهيدرات ، يتغير لون الوسط ؛
ه) وسائل الحفظ مخصصة للبذر الأولي ونقل المواد اللاحقة ؛ لديهم تفضيل للكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض وإهمال تطوير النباتات الرمية. مؤخرة هذه الوسيلة هي الجلسرين ، الذي ينتصر لاختيار القوة أثناء المتابعة ، والتي يتم إجراؤها بطريقة الكشف عن البكتيريا المعوية المنخفضة.
يتم اقتراح وصفات إعداد الوسطاء الشجاع على سبيل المثال قسم هجوم وتلك الخاصة بالجزء الآخر من المنديل.
مراقبة التغذية
1. أي نوع من الفيموج قد يكون راضيا عن أماكن المعيشة في الوسط؟
2. كيف تصنف المكونات الوسطى بالمكونات الخارجية؟
3. ما هي الخطب لتقوية الوسط؟
4. ما هي الوسطاء؟
5. ما هي الأجزاء الوسطى التي تسمى قابلة للطي ، ما هو أساسها؟
6. كيف تسمح لك الوسائط بمراعاة النمو الأكثر أهمية لبعض الميكروبات بينما تخنق البعض الآخر لمدة ساعة؟
7. ما هي الوسائط التي تظهر النشاط الأنزيمي للميكروبات؟
إدارة
املأ النموذج ، مع الإشارة إلى المجموعات التي تضيف الوسط.
تحضير الوسائط
أدوات إعداد الوسائط ليست مذنبة بالانتقام من خطابات الطرف الثالث ، على سبيل المثال ، المروج ، التي تراها بعض أنواع skla ، أو القاعات المؤكسدة ، والتي يمكن تناولها يوم الأربعاء عند الطهي її في أواني صدئة. دعونا نلعن أفضل أواني المينا أو الألومنيوم. يتم تحضير كميات كبيرة من الوسط (عشرات ومئات اللترات) في هاضمات أو مفاعلات خاصة (صغيرة 14). قبل الزرع ، يجب غسل الأطباق جيدًا وشطفها وتجفيفها. قم بغلي الأواني الزجاجية الجديدة مسبقًا لمدة 30 دقيقة في 1-2٪ حمض الكلور الهيدروكلوريك ، أو zanyruyut في نفس الوقت ليلاً ، وبعد ذلك يتم شطفها بالماء الجاري لفترة طويلة.
احترام! لا يمكن استخدام الأطباق المعدة لتحضير الوسائط في أغراض أخرى ، على سبيل المثال ، لتخزين الكواشف الكيميائية ، أو لإزالة التلوث ، والتي يمكن تطهيرها - يمكن أن تتسبب آثار التنقل في هذه الخطابات في نمو الكائنات الحية الدقيقة.
فيهيدنوي سيروفينالتحضير عدد كبير من الوسائط ، قم بتقديم منتجات رحلة مخلوق أبوروسلين: اللحوم و yogo zaminniki ، الحليب ، البيض ، البطاطس ، فول الصويا ، الذرة ، الخميرة وغيرها.
يتم طهي مرق الماشية الرئيسي في ماء اللحم أو الهضم ، ويتم إزالته مع التحلل المائي الحمضي أو الأنزيمي من syrovin. بوغليوني مع الهضم في 5-10 مرات اقتصادي ، أقل مع ماء اللحم. Seredovishcha على هضم غني بالأحماض الأمينية ، otzhe ، pozhivnishі ؛ يمكن تخزينها بشكل مؤقت ، بحيث يمكن الحصول على قيمة pH أكثر ثباتًا. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن تحضير الهضم من بدائل اللحوم (جلطات الدم ، المشيمة ، الكازين أيضًا).
في هذه الساعة ، تم تزويد المعامل بمياه اللحوم والهضم المركزي. غالبًا ما يتم تقشيرها بهضم البنكرياس الخاص بـ Hottinger أو الكازين المائي أو خمائر العلف. من tsikh napіvfabrikativ للغناء ، قم بإعداد الأدوات الوسيطة اللازمة.
خطوات الطبخالوسط: 1) البديل ؛ 2) تحديد قيمة الأس الهيدروجيني المثلى ؛ 3) الإضاءة. 4) الترشيح. 5) التعبئة. 6) التعقيم. 7) السيطرة.
دملوسائط على النار الساخنة ، حمامات الماء ، في الأوتوكلاف أو الغلايات ، والتي يتم تسخينها في أزواج.
إعداد الأس الهيدروجينيالوسطاء موجهون لمساعدة أوراق المؤشر. لتحديد الرقم الهيدروجيني بدقة ، يتم حفرها بمقياس جهد ، ويتم توصيل زجاج الأقطاب الكهربائية zastosovuyuschie بتعليمات المقارنة (جهاز Mikhailis) ، والذي يتكون من حامل ثلاثي القوائم مع مآخذ لأنابيب الاختبار (الشكل 15) ومجموعة من معايير الأس الهيدروجيني. عند تحضير الوسطيات ، تبدو مثل مؤشر methanitrophenol ، الذي يغير اللون في نطاق 6.8-8.4.
لتحديد الرقم الهيدروجيني لوسط أنبوب الاختبار 4 ، يتم وضع قطر القوارير ولونها ، والتي لا تتطابق مع أنابيب الاختبار مع المعايير ، في أعشاش 1 و 2 و 3 و 5 (شكل 15). في الأنبوبين الأول والثالث صب 5 مل من الماء المقطر ؛ في 5 سنوات - 7 مل ؛ في الثانية - 4 مل من الماء و 1 مل من المؤشر. في العش 4 و 6 ، حدد معيار الأس الهيدروجيني المطلوب. في أنابيب الاختبار الأول والثاني والثالث ، اسكب 2 مل من الوسط المبرد. بدلا من أنابيب الاختبار ، امزج.
لون ريدينز في أنابيب الاختبار يساوي الضوء الذي يمر من خلاله ، ويغلق الفتحة الخلفية بفلتر (غير لامع أو أزرق ، كما لو كان أصفر بشكل مكثف). يختلف الرقم الهيدروجيني للعينة المختبرة وفقًا لمعيار الأس الهيدروجيني ، والذي يتم اختيار اللون منه.
تحضير الوسيط عن طريق ضبط الأس الهيدروجيني ، في الأعشاش 4 و 6 حدد المعايير ، التي يكون الرقم الهيدروجيني لها قريبًا من اللازم ، وفي أنبوب الاختبار الثاني مع الوسيط والمؤشر المختبرين ، أضف من السحاحة نفس الكمية من المرج ، وكذلك الضوء في ضوء الاختبار الثاني للمعيار ، أو الفرق في الحموضة يشبه معيار الضوء. تضاف البركة (أو الحمض) حتى تهدأ ، حتى لا يتطابق لون العينة الأخرى مع لون المعايير. Kіlkіst lugu (أحماض أبو) ، أضف ما يصل إلى 2 مل من الوسط في عينتين ، pereahovuyut لكامل طول الوسط المحضر. على سبيل المثال ، قطرتان (0.1 مل) من 0.05 ن. مرج ، ثم لمعالجة 1 لتر من الضروري 500 مرة أكثر ، حتى 50 مل من 0.05 ن. أو 2.5 مل 1 ن. فتح المرج.
أثناء التعقيم ، ينخفض الرقم الهيدروجيني للوسائط بمقدار 0.2 إلى ذلك الخاص بإزالة الوسيط برقم هيدروجيني 7.2-7.4 ، ويتم تحضير قطعة خبز برقم هيدروجيني 7.4-7.6.
إضاءةيهتز الوسطاء ، كما لو كان عند الطهي ، رائحة كريهة kalamutnіyut أو أغمق. لتفتيح يوم الأربعاء ، يُسخن حتى 50 درجة مئوية ، يُسكب بياض بيضة الدجاج ويُخفق بالماء ويُحرّك ويُغلى. Zgortayuchis ، السنجاب zahoplyuє في حصار نداء الجزء الأوسط. بنفس الطريقة ، يمكن استبدال بياض البيض بمصل دم بديل (20-30 مل لكل 1 لتر من الوسط).
حمام الترشيحيتم اهتزاز الوسائط الجيلاتينية النادرة والذوبان من خلال الماء الورقي أو من خلال مرشحات mater'yan. من الصعب ترشيح أوساط الأجار - فالرائحة الكريهة تنتشر بسرعة. صوتهم من خلال مرشح شاش قطني (يتم وضع قطعة من الشاش بالقرب من برج العذراء وكُتب عليها صدر من الصوف القطني). من الممكن استخدام ورق vikoristovuvaty أو ترشيح mater'yan ، لذلك قم بإجراء الترشيح في الأوتوكلاف الساخن أو في virvah باستخدام pidgrivom.
يمكن استبدال ترشيح وسائط أجار بالظروف. يُسكب الوسط بالقرب من وعاء أسطواني طويل ويذوب في الأوتوكلاف. في حالة التبريد الكافي لمنتصف جهاز اللف ، غالبًا ما يستقر الهواء الموجود فيه في القاع. في اليوم التالي ، تتم إزالة جلطة الآجار من الوعاء (حيث يتم وضع السفينة مؤقتًا بالقرب من الماء الساخن) ويتم قطع الجزء السفلي من الحصار بسكين متراكم. يذوب الجزء العلوي ويسكب في الجزء العلوي من الحاوية.
تعبئةالوسطاء في أنابيب الاختبار (3-5 مل أو 10 مل لكل منهما) ، قوارير ، قوارير ، مراتب وكرات لا تزيد عن ثلثي السعة ، لذلك أثناء التعقيم ، يمكن أن تتبلل الفلين وتفقد الوسطاء العقم.
الوسط ، مثل المعقم عند درجات حرارة أعلى من 100 درجة مئوية ، يُسكب في أطباق نظيفة وجافة. يتم سكب الوسائط التي يتم تعقيمها عند درجات حرارة منخفضة obov'yazkovo بالقرب من الأطباق المعقمة.
صب المنتصف للحصول على مساعدة من علبة سقي ، وفي نهايتها يتم وضع أنبوب اللثة من zatiskach Mora. للتعبئة السلمية ، ضع الأكواب والسحاحات والموزعات والمحاقن والماصات بشكل رفيع (صغير 16).
يتم إغلاق الأواني من المنتصف بسدادات من الشاش القطني ، توضع فوقها أغطية ورقية. من المهم أنه عند السكب ، لا يبلل الوسط حواف الأطباق ، وإلا فقد يلتصق الفلين بها. إرفاق ملصق باسم مكان الإقامة وتاريخ التحضير على وعاء الجلد.
تعقيم. يجب أن تودع طريقة التعقيم في المستودع الخاص بوسط الإقامة والمؤشرات الخاصة بهذه الوصفة. يظهر مخطط Zrazkova لطريقة تعقيم الوسائط في الجدول. ثمانية.
1 (من المرجح أن يتم تعقيم بعض الوسائط التي تحتوي على الكربوهيدرات والبروتينات والفيتامينات للحصول على مرشحات بكتيرية إضافية.)
السيطرةالوسائط المحضرة: أ) للتحكم في عقم الوسائط ، ضعها في منظم الحرارة لمدة يومين ، وبعد ذلك تتم مراجعتها. ومع ذلك ، لا توجد علامات على النمو في البيئات ، فهي تعتبر عقيمة ويتم نقلها للتحكم الكيميائي في كمية الآفات الجلدية ؛ ب) التحكم الكيميائي: استعادة الأس الهيدروجيني المتبقي ، بدلاً من النيتروجين الكلي والأميني ، الببتون ، الكلوريدات (قد تكون كميتها هي نفسها كما هو مذكور في الوصفة).
يتم إجراء التحكم الكيميائي للوسائط في المختبر الكيميائي ؛ ج) من أجل المكافحة البيولوجية ، تُزرع سبرط من بذور الوسط مع مزارع مختارة خصيصًا من الكائنات الحية الدقيقة ، ولنموها للحكم على حياة (نمو) قوة الوسط. يتم إضافة ملصق وجواز سفر إلى الوسيط النهائي ، واسم مستودع الوسيط ، ونتائج المراقبة وما في.
إنهم يعتنون بمتوسط درجة حرارة الغرفة في الخزانات ، وهو مخصص لهم بشكل خاص. Deyakі seredovishcha ، على سبيل المثال ، seredovischa بالدم والفيتامينات ، خذها من الثلاجة.
وصفات لتحضير وسائط بسيطة (أساسية) وكلوريد الصوديوم متساوي التوتر
محلول متساوي التوتر من كلوريد الصوديوم. أضف 9 جم من كلوريد الصوديوم إلى 1 لتر من الماء المقطر. مرشح Rozchin ، اضبط مهام الأس الهيدروجيني ، حسب الحاجة ، وعقم عند 120 درجة لمدة 30 دقيقة.
مرق لحم الببتون (MPB). أضف 1٪ ببتون و 0.5٪ x إلى ماء اللحم. بما في ذلك كلوريد الصوديوم ، يُغلى على نار خفيفة لمدة 10-15 دقيقة لفتح الفم ، واستعادة درجة الحموضة المطلوبة ، ويُغلى مرة أخرى لمدة 30-40 دقيقة حتى ينتهي الحصار. قم بالتصفية ، أضف إلى الحجم الأساسي بالماء وعقم لمدة 20 دقيقة عند 120 درجة.
Bouillon Hotinter. هضم هوتينجر مع الماء 5-6 مرات إراحة ، اعتمادًا على مقدار النيتروجين الأميني الذي يمكن التخلص منه ومقدار ما يمكن أن يكون في المرق (المشار إليه في جواز سفر الهضم وصفة الوسط). على سبيل المثال ، لتحضير وسيط به 1.2 جم / لتر من النيتروجين الأميني ، تم هضمه إلى 9.0. يجب تخفيف جم / لتر 7 5 مرات (9.0: 1.2). يضاف 0.5٪ كلوريد الصوديوم إلى الهضم المخفف ويغلى على نار خفيفة حتى يصبح الملح صافياً.
أجار ميسوببتون (MPA). إلى المرق النهائي (قبل التعقيم أو بعده) ، أضف 2-3٪ من أجار أجار المكرر واتركه يغلي مع التحريك على نار ضعيفة حتى يذوب الآجار تمامًا. يمكن غلي MPA في الأوتوكلاف أو جهاز Koch. الوسط جاهز ، لأنه ضروري ، خفيف ، مرشح ومعقم لمدة 20 ساعة عند 120 درجة مئوية.
Napіrіdky أجار سميت 0.4-0.5٪ أجار أجار.
جيلاتين جيفيلني. أضف 10-15٪ من الجيلاتين إلى المرق الجاهز ، وقم بتسخينه حتى يذوب (لا تغلي!) ، واسكبه في أطباق معقمة وعقمه ببخار عادي.
وصفات لصنع قلب قابل للطي
متوسطة مع الكربوهيدرات. أضف الكمية المطلوبة (0.1-2٪) من الكربوهيدرات النقية (على سبيل المثال ، الجلوكوز) إلى المرق الرئيسي للأجار المذاب. بعد ذلك ، يتم سكبها في أطباق معقمة وتعقيمها بزوج مستقيم. غالبًا ما يتم تدمير شظايا الكربوهيدرات في هذا الوضع من التعقيم ، والأهم من ذلك 25-30٪ من الاختلافات في الكربوهيدرات ، والتعقيم من خلال مرشح بكتيري ، وإضافة التعقيم الضروري إلى الوسائط الرئيسية المعقمة - بعد التحكم في العقم ، يكون اللب هو جاهز للزرع.
منتصف الدمتحضير 3 وسائط بسيطة معقمة ، مكملة في خزانات معقمة (ويفضل أن تكون في صناديق) بما يصل إلى 30٪ (لنقل 5٪) من الدم المعقم منزوع الليف. يتم إذابة الوسطاء أجار وتبريدهم إلى 45 درجة مئوية قبل الصم. عند درجة الحرارة المطلوبة ، يمكن تحملها على أنها ساخنة ، ولكن ليس أوبيكو. بعد إضافة الدم ، حتى يتم تجاوز الوسط ، بدلاً من الحكم ، يقومون بخلط وصب الأكواب أو أنابيب الاختبار بحزم.
احترام! لا يمكنك البصق في المنتصف بالدم - فالدم يمكن أن يغير سلطتك.
بين الدم الرماديتحضير مثل هذا ، مثل منتصف الدم. أضف إلى الوسط الرئيسي 10-20٪ من المصل ، حتى لا تنتقم من المادة الحافظة ويتم تعطيلها للأمام عند 56 درجة مع امتداد 30 دقيقة في حمام مائي أو في معطل. عند تعطيله ، ينهار الكلام (المكمل) ، كأثر ضار على الميكروبات.
في منتصف العمر. إلى الوسائط البسيطة ، أضف jovch بكمية من 10-40٪ من الوسط ، واستعد الرقم الهيدروجيني المطلوب وقم بتعقيمه لمدة 20 دقيقة عند 120 درجة مئوية. يمكنك إضافة jovch المعقمة إلى وسط معقم في حفر معقمة.
تعبئة وسط أجار في طبق بتري. قبل التعبئة ، يذوب الوسط في حمام مائي ويبرد إلى 45-50 درجة مئوية. بالنسبة لكوب بقطر 9 سم ، أضف 15-20 مل من الوسط (ارتفاع الكرة 0.25-0.3 سم). نظرًا لأن الكرة أكبر ، تنظر المستعمرات إلى الكرة الأصغر الجديدة في المقابل. في قوس الكرة الرقيقة ، هناك حفنة من الخطب المميتة والملفوفات (المنتصف شفيدكو متدلي) تحدها بشكل حاد - تتضاءل تنمية العقل.
صب الوسطاء في أكواب معقمة في خزانات معقمة. ضع الأكواب بغطاء ، واحترق. خذ الإناء بمنتصفه من اليد اليمنى ، مقلصًا لهيب النار. باليد اليسرى ، يعصرون الفلين ، ويضغطون عليه بإصبعه الصغير وهذا الجانب. احرق رقبة القاضي وبإصبعين من اليد اليسرى برفق قم بعمل غطاء. أدخل تحت عنق القارورة دون الالتصاق بحافة الكوب. يسكب الوسط ، غرزة ، بحيث يرتفع بالتساوي على طول قاع الكأس. كما لو ، عند صبها على سطح الوسط ، يتم تثبيت المصابيح مرة أخرى ، قبلها ، مثل منتصفها ، تجلب نصف يوم من sirnik أو palnik - ستقشر المصابيح. ثم نغلق الكأس ونترك الوسطاء يُقبض عليهم. يقضي Yakshcho sivba في يوم التعبئة ، الوسط ضروري حتى يجف. بالنسبة لهذا الكوب في منظم الحرارة ، افتح أغطية الكوب بعناية وقم بتثبيتها على أن يكون الجانب المفتوح لأسفل لمدة 20-30 دقيقة. كيف تقضي اليوم التالي بعد تعبئتها ، الأكواب ، لا تجف ، تحترق على نفس الورقة التي تعقمها ، وتضعها في الثلاجة.
إعداد مائل أجار. توضع أنابيب الاختبار التي تحتوي على 4-5 مل من وسط أجار معقم في وضع ضعيف (حوالي 20 درجة تحت القطع) مع وجود فجوة بحيث لا يتجاوز الوسط ثلثي الأنبوب ، وإلا فإنه يمكن أن يبلل الفلين. بعد ذلك ، عندما يتم التقاط الوسط ، ضع أنابيب الاختبار عموديًا - لإفراغ المكثف. من الأفضل أن تعتاد على قطع أجار طازج.
احترام! ليس من الممكن coristuvatysya مع الوسط ، حيث لا يوجد مكثف. Її بعد ذلك أذيب الورود مرة أخرى في حمام مائي وأجز.
وسط جاف
Vitchiznyana promyslov_st vpuskaє وسيلة جافة ذات تمييز مختلف: بسيطة ، اختيارية ، تشخيصية تفاضلية ، خاصة. تسي مساحيق في زجاجات ذات أغطية من شأنها أن تنفجر. يأخذون الوسط الجاف من الضباب المظلم ويغلقونه - الرائحة الكريهة هي استرطابية. في المختبر ، تستخدم المساحيق لإعداد الكتب المتوسطة على الملصقات.
تعتبر ميزة الوسائط الجافة في الأوساط النقية المحضرة في المختبر قياسية (يتم إنتاجها على دفعات كبيرة) ، سهولة التحضير ، بحيث يمكن إتاحتها في أي عقول (تنقل) ، استقرار ، اقتصاد. من المهم أن يتم تحضيرها من بدائل اللحوم: الكازين المتحلل ، والفيبرين ، والاسبراتس ، ولتحفيز أجزاء البروتين من الخلايا الميكروبية (الساركين).
مراقبة التغذية
1. كيف يمكنني استخدام الرقم الهيدروجيني للوسط لزراعة المزيد من الميكروبات المسببة للأمراض قبل التعقيم ولماذا؟
2. في أي درجة حرارة تذوب مواد الأجار وتلتقط؟
3. كيف يقع اللوم على تحضير الأطباق التي تُسكب فيها المواد الكربوهيدراتية والبروتينات؟
إدارة
1. تحضير MPB ، MPA ، مرق و Hottinger agar pH 7.2-7.4 ، صب في قوارير وأنابيب الاختبار ؛ طهر.
2. تحضير من مساحيق جافة من وسط هيس ، صب في أنابيب اختبار 4-5 مل وتعقيم.
3. تحضير أجار الدم وصب اليوجو في أطباق بتري.
4. تحضير من مساحيق جافة من منتصف إندو ، إي إم سي ، بلوسكيريفا وصبها في طبق بتري.
5. تحضير مائل أجار.
طرق Posiviv
يعد النشر خطوة مهمة في المتابعة البكتريولوجية. من الضروري دراسة طبيعة مادة البذر ووسيلة الدعارة في طرق البذر المختلفة. تشمل جميع الروائح الكريهة طريقة الربط: الحماية من ميكروبات الطرف الثالث. لهذا ، تدرب على الصيام التالي ، ولكن بدون رخيف حاد ، والذي سيساعد الكوليفانا في كل مرة. لا يمكن الحديث عن ساعة posіvіv. تعمل بشكل أفضل في الملاكمة.
احترام! لا تنس اتباع قواعد السلامة الخاصة لمدة ساعة من العمل مع المادة.
البذر من أنبوب الاختبار إلى أنبوب الاختبار. يتم ذبل أنبوب الاختبار الذي يحتوي على المادة الأصلية وأنبوب الاختبار مع الوسط قليلاً في اليد اليسرى بين الإبهام والأصابع بحيث تكون حواف أنابيب الاختبار على نفس المستوى ، وتكون قواعدها أعلى الفرشاة. صوت أنبوب الاختبار من مصدر المواد بالقرب منك. في اليد اليمنى ، مثل قلم الكتابة ، يقومون بقص الحلقة البكتيرية ، وتعقيمها ، وتقليمها عموديًا في شكل نصف قمر. باستخدام الإصبع الصغير لتلك الحافة من راحة اليد اليمنى ، تخلص من الاختناقات المرورية في الحال. إطلاق النار على الفلين ليس مع البرشمة ، ولكن بسلاسة - مع حركات ملتوية خفيفة. غمز الفلين ، حواف أنابيب الاختبار محترقة بنصف قمر من palnik. أدخل الحلقة المقلية من خلال نصف قمر من البالنيك في أنبوب الاختبار مع المادة الوسطى ، وقم بتبريدها ، وبعد جمع القليل من المادة ، قم بنقلها بعناية إلى أنبوب الاختبار من المنتصف.
عند زراعة الوسط ، تُفرك المادة الأخيرة على جدران أنابيب الاختبار فوق الوطن الأم وتُخطّط بالوسط.
عند الزراعة على وسط عادي مع سدادة قطنية ، يجب غسل اليوجا في المنتصف لمدة 3-5 ثوانٍ ، وشطفها بها. عند وضع sivbі في قلب الوسط ، يتم فرك المادة على السطح ، ولف سدادة قطنية ، وبعد ذلك لا يصاب السدادة بالعدوى (توضع في أنبوب الاختبار ، بنفس الطريقة التي توصل بها إلى المختبر ، يتم تعقيمها) .
احترام! ضع في اعتبارك أن الوسط لم يهتز ولم يبلل الفلين.
عند استخدام sivbі على حواف أجار ، يجب فرك المادة على سطح الوسط باستخدام رو متعرج من أسفل إلى أعلى التل ، بدءًا من بين المكثفات.
عندما sіvbі على وسطاء schіlnі ، يُسكب في أنابيب الاختبار باستخدام موقد ، يخترق الموقد بحلقة مع المادة ، ويهتز حتى تزرع الصفوف بـ "وخز".
بعد البذر ، تُخرج الحلقة من أنبوب الاختبار ، وتُحرق حواف أنابيب الاختبار ، وبعد تمرير المقابس عبر نصف عرض البالنيك ، تُغلق أنابيب الاختبار ، وبعد ذلك تُقلى الحلقة.
يمكن أن تزرع المواد النادرة باستخدام ماصات معقمة (باستور أو تخرج). بعد البذر ، سوف zanuryuyut الماصات في تطهير الوطن الأم.
يهتز Posіvi عند الزجاجات والمراتب والزجاجات تقريبًا ، لذلك ، كما هو الحال في أنبوب الاختبار ، ما عليك سوى التقاط المواد من الخلف (مع حلقة أو ماصة) ، ثم فتح الوعاء مع المنتصف.
يتم كتابة القضاة من الثقافة المزروعة ووضعهم في منظم الحرارة.
البذر على أنابيب الاختبار من أطباق بتري. شخصية Vivchivshi من الثقافة المتنامية على الوعاء ، من جانب القاع ، مع شجرة زيتون من الشمع ، الزرع الضروري لـ delyanka. ضع كوبًا من مادة غنية أمامك بغطاء محترق. افتح الغطاء باليد اليسرى وأدخل الحلقة المحروقة تحته. بعد تبريد الحلقة ، اجمع الإمدادات والمواد من قطعة الأرض المحددة. نصنع حلقة ونغلق الكوب ونأخذ أنبوب اختبار من منتصف اليد اليسرى. يتم البذر بنفس الطريقة ، مثل من أنبوب الاختبار إلى أنبوب الاختبار. بعد أن أضع الكأس ، اقلبه رأسًا على عقب.
البذر على أجار بالقرب من طبق بتري. البذر بملعقة. الملعقة عبارة عن أنبوب زجاجي أو معدني ، تكون نهايته مثنية بمظهر التريكوتنيك. يمكن عمل الملعقة مع ماصة البسترة ، zignuvshi تحت kutom її kіnets الرقيقة ، أمامها في نصف قمر البالنيكا.
افتح الغطاء برفق باليد اليسرى ، واضغط عليه بإصبع رائع ومثير للإعجاب. باستخدام حلقة أو ماصة أو بعصا زجاجية ، قم بتطبيق مادة التغطية على سطح الوسط ، وبعد ذلك تقوم بفركها بعناية باستخدام ملعقة دائرية doti ، لا تتوقف عن تحريك الملعقة على طول سطح الوسط ، باستخدام مع يدك اليسرى ، تقليم الغطاء ولف الكوب على الفور. عند الانتهاء من البذر ، تتم إزالة الملعقة من الكأس وإغلاق الغطاء. يتم وضع ملعقة صرير بالقرب من المطهر ، ويتم قلي الملعقة المعدنية بالقرب من نصف الموقد.
زرع حلقة. يتم فرك كمية صغيرة من مادة الزراعة (حتى لو تم مزجها أمام وردة متساوية التوتر أو مرق) بحلقة في سطح منتصف حافة الكوب ، يتم تمرير الإسبرط مرة واحدة عبر الحلقة من الجانب إلى المنقار. دعنا ننتظر حتى نهاية ذلك الشهر ، عندما تنتهي السكتات الدماغية ، اخترق الأجار بحلقة ، مع معرفة الكثير من مادة البذور. تنتشر المادة المتبقية ، التي تُركت على الحلقات ، بكشكشة تشبه الزجزاج على كامل سطح الوسط. بعد الانتهاء من البذر ، أغلق الكوب وأزل الحلقة.
زرع حلقة في القطاع. الكوب من جانب القاع مجعد إلى قطاعات. تتأرجح البذر بموجات تشبه الزجزاج من حافة الكأس إلى المركز. من الضروري الحفاظ على الغرز حتى لا تدخل السكتات الدماغية إلى قطاع الأرض.
البذر مع سدادة قطنية. يجب إحضار سدادة قطنية تحتوي على مادة إضافية في الكوب عند الفرك وفركها بملابس دائرية على سطح الوسط ، ولفها حول السدادة والكوب.
بذر العشب. يتم وضع ما يقرب من 1 مل (20 نقطة) من مزرعة محلية (مثل مزرعة من وسط المعدة ، والتي يمكن مزجها مع مجموعة متنوعة متساوية التوتر أو مرق) على سطح أجار ونشر البراز بعناية على سطح المتوسط. يتم شفاء الكأس بشكل خفيف وباستخدام ماصة ، تتم إزالة الثقافة الزائدة ، والتلويح في المطهر. هناك وضعوا ماصة.
زرع أجار مع الرفيق. يجب إضافة الثقافة المزروعة على وسط نادر ، أو مادة مستحلب إلى وعاء مع ذوبانه وتبريده إلى 45 درجة مئوية أجار ، وخلطه وتذبذب في طبق بتري معقم. يمكنك إضافة مادة إضافية إلى كوب فارغ وسكب 15-20 مل من أجار مبرد إلى 45 درجة مئوية. للخلط في مكان الكوب ، يتم سرقة الكرات ولفها. تُترك الكؤوس على المنضدة حتى يتم صيد المنتصف.
كؤوس الإضاءة موقعة من جانب القاع وتوضع في الترموستات مع الأسفل إلى الأعلى.
مراقبة التغذية
1. ما الذي تحتاجه لغسيل معقم ليوم من السببي؟ تقريبه.
2. كيف يلزم استكمال مساحة العمل بعد الزراعة؟
طرق الزراعة
من أجل زراعة ناجحة ، حدد krіm بشكل صحيح وسطًا وزرعًا بشكل صحيح ، فأنت بحاجة إلى العقل الأمثل: درجة الحرارة ، محتوى الرطوبة ، التهوية (تكرار التصحيح). كقاعدة عامة ، يُسمح للعقول الواعية أن تخلق البيئة الطبيعية واعية بحزم.
درجة حرارة. يتم تحديد درجة الحرارة المثلى لزراعة معظم الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض (37 درجة مئوية) في منظم الحرارة (الشكل 17). هذا ملحق مصنوع من جدران متدلية ، والتي يمكن التعرف عليها مرارًا وتكرارًا ، أو الماء الذي يتم تسخينه بالكهرباء. Vіn zabezpecheniy مع منظم الحرارة ، والذي يقوم تلقائيًا بضبط درجة الحرارة المطلوبة ، وميزان حرارة للتحكم في درجة الحرارة.
يتم تثبيت أنابيب الاختبار مع المحاصيل في الرفوف وشبكات السهم أو الجرار على جهاز تنظيم الحرارة. يتم قلب الأكواب الموجودة في منظم الحرارة رأسًا على عقب. لذلك ، التكرار في منظم الحرارة ، تم تداوله بحرية وكانت التدفئة متساوية ، انفجرت الشرطة في منظم الحرارة بجروح ولم تطغى. من أجل عدم تبريد المزرعة ، لا يحرمها منظم الحرارة من الماء العذب.
يمكن للمساعد المختبري لتضخم الغدة الدرقية تسجيل درجة الحرارة في منظم الحرارة وتحسين النظافة في الملحقات ، وفي حالة حدوث عطل ، اتصل بالسيد.
خفيفةليست هناك حاجة إلى أهم الميكروبات (يمكن رؤية جميع مسببات الأمراض قبلها) - فهي تزرع في الأشجار الداكنة. ومع ذلك ، بالنسبة لزراعة التصبغ ، نظرًا لأنه أكثر نشاطًا في الضوء الوردي ، فإن الثقافة بعد منظم الحرارة تهتز لمدة 2-3 أيام في ضوء الغرفة.
احترام! الضربة الفريدة التالية للتبادلات المباشرة من سوني ، والتي تضر بالثقافة.
محتوى الماء. حياة الميكروبات مستحيلة بدون علم vology - حياة الكلام تخترق الكليتين أقل من مظهر rozchinennym. من الضروري الحماية عند الزراعة على أوساط مفتوحة: صبها في كوب وقم بقصها في أنابيب الاختبار أكثر من يوم بذر. عند زراعة ميكروبات حساسة بشكل خاص لوجود الماء ، على سبيل المثال المكورات البنية ، ضع منظم حرارة في وعاء مملوء بالماء.
شروط الزراعة. تتم زراعة معظم الميكروبات المسببة للأمراض لمدة تتراوح بين 18 و 24 عامًا ، لكن لاحظ أنها تنمو بشكل صحيح (حتى 4-6 أيام). من أجل توفير الماء بداخلها ، يجب استبدال سدادات القطن بأخرى دبالية معقمة ، أو وضع ضمادات دبالية عليها.
احترام! يتم تعقيم فلينات العلكة في الأوتوكلاف وحرقها في الورق.
تهوية. لاستهلاك الميكروبات في صورة حامضة حرة ، يمكن تقسيمها إلى الهوائية واللاهوائية. سوف تتطلب المجموعات الهجومية عقول مختلفة للزراعة.
المكملات الحامضة ، اللازمة لزراعة الهوائية واللاهوائية الاختيارية ، تتطور مع التهوية السلبية والنشطة.
التهوية السلبية - الزراعة على أوعية رفيعة ونادرة في أوعية ، مغلقة بسدادات قطنية أو شاش قطني ، أو أطباق بتري. مع مثل هذه الزراعة ، تحافظ الميكروبات على الحموضة ، وهناك اختلافات في الوسط ، والتي توجد في الوعاء فوق الوسط وتأتي من خلال القشرة. يمكن زراعة المزارع ذات التهوية السلبية على السطح أو على كرة رقيقة من الوسط ، حيث يخترق الهواء الحامض.
تكون التهوية النشطة راكدة مع زراعة الجليبين للميكروبات ، إذا نمت في الوسيط الكبير للوسط. من أجل ضمان الحموضة الكافية لمثل هذه الثقافات ، يتم وضعها في goydalka خاص - إعادة خلط مستمر للثقافات لضمان سلامة التكرار. عند الزراعة في Obyagi rіdini ، والتي تصل إلى عشرات ومئات اللترات ، والتي يتم تنفيذها في ملحقات ، تسمى مفاعلات أو مخمرات ، يتم نفخها مرة أخرى من خلال الثقافة لمساعدة المباني الملحقة الخاصة.
زراعة اللاهوائيةتعتبر الأسقلوب المطوية والسفلية الهوائية ضرورية للسماح بالوصول إلى الهواء الحر. لمن تحتاج إلى تكرار وسيلة الحياة بطرق مختلفة.
زراعة الفطريات الشعاعية والفطريات والميكوبلازما وأشكال L واللولبيات وأبسطها. إن زراعة هذه الكائنات الدقيقة تشبه إلى حد كبير زراعة الميكروبات. بالنسبة لهم ، تم تطوير وسائل إعلام خاصة وأنظمة مختارة تلبي احتياجاتهم.
تسمى الثقافة النقية مجموعة من الميكروبات من نفس النوع على وسط حي قلوي أو نادر.
نحن نستخدم عددًا من الطرق لرؤية الثقافة النقية البور من حيث قوة المادة التي يتم زراعتها ، و meti dosledzhennya. مزارع نقية سليمة من المستعمرات المعزولة - تركيز الميكروبات على الوسط القلوي. من المهم أن نلاحظ أن معظم المستعمرة تتطور من خلية جرثومية واحدة ، بحيث تكون ثقافة نقية لتلك الكائنات الحية الدقيقة.
مراحل رؤية الثقافة النقية:
اليوم الأول - إزالة المستعمرات المعزولة. أسقط المادة النهائية بحلقة ، ضعيها باستخدام ماصة أو عصا زجاجية على سطح الأجار في أطباق بتري. استخدم ملعقة لفرك المادة على سطح اللب ؛ دون proplyuyuchi ودون قلب الملعقة ، انشر البذرة في الثانية ، ثم في الوعاء الثالث. مع هذا الانتشار ، يحتوي الكوب الأول على الكثير من المواد والكثير من الميكروبات ، والكوب الثاني أقل ، والكوب الثالث أقل.
يمكنك إزالة عزلة المستعمرات بحلقة الأشقاء. لهذا الغرض ، يتم استحلاب المادة في مرق أو كلوريد الصوديوم متساوي التوتر.
اليوم الثاني - الميكروبات تنمو على أكواب. في الكوب الأول ، يبدو الصوت ينمو بشكل أكثر نجاحًا - لا يمكنك رؤية المستعمرة المعزولة. تنمو المستعمرات المعزولة على سطح أجار في الصفحتين الثانية والثالثة. يتأرجحون بالعين التي لا تعرف الكلل ، للحصول على مساعدة إضافية ، مع زيادة طفيفة في المجهر وفي حالة المجهر المجسم (القسم 31). تؤخذ مستعمرة من جانب قاع الطبق وتحويلها إلى حواف أجار. Posivi لوضع منظم الحرارة.
احترام! من الممكن تحطيم المستعمرات الأقل عزلة.
اليوم الثالث - زراعة طبيعة النمو على أجار مائل. سرقة اللطاخة ، بعد أن تغير farbuyut yogo i ، أن الثقافة نقية ، انتقل إلى її vyvchennya. ستنتهي رؤيته للثقافة النقية. يُرى من الغناء dzherel ، أن هذه الثقافة المزروعة تسمى سلالة.
عندما ترى مزرعة دم نقية (زراعة دموية) أمام الوسط النادر: يتم تلقيح 10-15 مل من الدم المعقم المأخوذ في 100-150 مل من الوسط النادر. لذا خجول من الشخص الذي لديه القليل من الميكروبات في الدم. Spivvіdnoshenie krovі ، shо sіvaєєєє ، i zhivotnoe sredovischa 1:10 not vypadkovo - حتى تصل إلى دم rozvedennâ (دم غير ممزوج zhubno іє іє على mikroorganіzmi). يجب وضع كولبي في منظم الحرارة. من خلال dobu (وبعد أكثر من ساعة من الزراعة البور ، والتي يمكن رؤيتها) بدلاً من القوارير ، قم بإسقاط الشنق على الأطباق لعزل المستعمرات. إذا لزم الأمر ، كرر التعليق على فترات من 2-3 أيام.
عندما ترى ثقافة نقية من القسم ، وغسل مياه الصرف وغيرها من القوارض ، يتم طردهم إلى الأمام في خزانات معقمة ويزرع الحصار. بعيدًا ، تتذبذب رؤية الثقافة النقية بطريقة غير عادية.
لرؤية ثقافة نقية ، يتم زرع الوسائط الانتقائية على نطاق واسع.
هناك عدد من الطرق لتطوير الثقافات غير المباشرة النقية لها سمات بيولوجية للميكروب الذي يمكن رؤيته. على سبيل المثال ، عند رؤية البكتيريا المكونة للأبواغ ، قم بالتسخين عند 80 درجة لمدة 10 دقائق ، والقيادة في شكل نباتي ؛ في حالة رؤية السل بودنيك المقاوم للأحماض والمروج ، وبمساعدة هذه الخطب ، يتم تقليل المادة في شكل النباتات المصاحبة ؛ لرؤية المكورات الرئوية وعصي الطاعون ، يجب إعطاء المادة لمزيد من الفئران - في هذا الكائن الحي ، وهو شديد الحساسية لهؤلاء الأشخاص ، تتكاثر الميكروبات بسرعة أكبر من غيرها.
في الروبوتات المتقدمة علميًا ، خاصة للدراسات الجينية ، من الضروري أخذ الثقافات من خلية واحدة. هذه الثقافة تسمى استنساخ. بالنسبة إلى її otrimannya ، غالبًا ما يتم تقشيرها باستخدام معالج دقيق - مرفق ، بأدوات (إبر ، ماصات) من التوسعات المجهرية. للحصول على مساعدة من تريماش تحت سيطرة المجهر ، يجب حقنها بالعقار "القطيرة المعلقة" ، واتخاذ clitina (واحد) ونقلها إلى وسيلة الحياة.
رؤية الثقافات
مورفولوجيا Vivchennya ، الانهيارات ، قوة tinktorial من السلطة (div. Rodil 3) ، طبيعة zrutanni في الجوهر (القوة الثقافية) ، الأنزيمية النشطة في أدنى مستويات رؤية سيارات الأجرة yogo ، وتصنيف Tobto ، بالقرب من yogo، متنوعة. يطلق عليه تحديد الهوية. التعرف على الكائنات الحية الدقيقة مهم أيضًا في تشخيص العدوى ، وإدخال dzherel والقنوات في عمليات النقل وبأدنى النتائج العلمية والعملية.
الهيئات الثقافية
تنمو أنواع مختلفة من الكائنات الحية الدقيقة بطرق مختلفة على الوسائط. تخدم Tsі vіdminnosti التمايز. بعضها جيد للنمو على وسائط بسيطة ، والبعض الآخر قوي ولا ينمو إلا في وسائط خاصة. يمكن أن تعطي الكائنات الحية الدقيقة نموًا خفيفًا (pishne) أو سلامًا أو بخيلًا. يمكن أن تكون الثقافات bezbarvnimi ، siruvatimi ، siro-blakitnimi. قد تكون مزارع الكائنات الحية الدقيقة ، التي تصنع الصبغة ، مختلفة في اللون: أبيض ، أصفر أو ذهبي في المكورات العنقودية ، الشيرفون - في العصا المعجزة ، الأزرق والأخضر - في العصا الخضراء المزرقة ، تختلف الصبغة في الماء ، السربنتين ليس فقط.
على schіlnyhمن بين الكائنات الحية الدقيقة في البور ، اعتمادًا على كمية مادة الزراعة ، تمت الموافقة على سكروز سكروز ("العشب") ، أو المستعمرات المعزولة. الثقافات خشنة ومنخفضة ، فجوات ومعتمة ، مع سطح غير لامع ، لامع ، أملس ، قصير ، جاف ، وعر.
يمكن أن تكون المستعمرات كبيرة (قطرها 4-5 مم وأكبر) ومتوسطة (2-4 مم) وصغيرة (1-2 مم) وقزمة (أقل من 1 مم). يتم تمييز الرائحة الكريهة من خلال الشكل ، والتعفن على سطح الوسط (opukli ، مسطح ، يشبه القبة ، مكتئب ، دائري ، يشبه الوردة) ، من خلال شكل الحواف (متساوية ، مجعدة ، ممزقة).
نادريمكن للكائن الحي الدقيق الأوسط أن يصنع كارثة سلسة ، ويعطي حصارًا (حبيبي ، يشبه المنشار ، يشبه البلاستيك) أو يبصق (سفلي ، خشن ، متجعد).
علي سبيل المثالعندما تُزرع الميكروبات بوخز ، فإنها تصبح غائمة ، والأوساط الوسطى تصبح غائمة ، وتنمو الميكروبات الوسطى فقط بعد "الوخز" ، مما يسد فتحة الفجوة.
تشير القوى الثقافية ، مع التأكيد على طبيعة نمو الثقافة ، بعين بسيطة ، بمساعدة عدسة مكبرة تحت تكبير صغير من مجهر ، أو مجهر مجسم تآكل. يظهر حجم وشكل المستعمرات وشكل الحواف والشفافية في الضوء الذي يمر من خلاله ، بالنظر إلى الأكواب من جانب القاع. في الضوء المكسور (من جانب الغطاء) ، يتم تحديد طبيعة السطح ، الفراء. يتم تحديد الاتساق من خلال نقطة الحلقة.
القوة المورفولوجية
يمكن أن تكون دراسة مورفولوجيا الميكروبات بمثابة تمييز بينها. لوحظ التشكل في المستحضرات المعالجة. استعادة شكل وحجم الكليتين ، توسعها في التحضير ، وجود الجراثيم ، الكبسولات ، الأسواط. في المستحضرات farbovanized ، من الضروري إحضار الميكروبات إلى farb (القوة الصغرية) - من الجيد أو السيئ أخذ farb ، حيث يمكن إحضاره إلى zabarvlen التفاضلي (لمثل هذا اللون ، إنه zabarvlyuєtsya لـ Gram و Tsil - Nielsen و іn. ). يسمح لك zabarvlennya الحيوي (الحي) بتثبيت الرعونة ، للتمييز بين الخلايا الحية والميتة ، لمتابعة podil الخاص بهم. يمكن معالجة التقسيم الفرعي والتفتت في مستحضرات أصلية (غير ملوثة) (قسم 3).
النشاط الأنزيمي
يختلف النشاط الأنزيمي للكائنات الحية الدقيقة في باجات. يمكن استخدامه كنوع ونوع ينتمي إلى ميكروب ، ويمكن استخدامه لتعيين متغيره (ما يسمى بالمتغير الحيوي). دعونا نلقي نظرة على القوة الأنزيمية الرئيسية لموعد اليوغا yakіsne.
تكسير الكربوهيدرات(نشاط محلول للسكريات) ، بحيث تنمو القدرة على تحلل السكر والكحول الذري الغني بالأحماض الذائبة والغازات الحمضية على وسطاء Hiss ، وينتقم الياكو من أقل الكربوهيدرات ومؤشرًا. تحت تأثير الحمض ، الذي يرضي عند الانقسام إلى الكربوهيدرات ، يغير المؤشر تلوث الوسط. هذا هو السبب في أن الوسط يسمى "صف السلسلة". الميكروبات ، التي لا تتخمر إلى كربوهيدرات ، تنمو في الوسط دون تغييرها. تم إثبات وجود الغاز لإغلاق المصابيح في الوسط بأجار ، أو لتجميع اليوجا في "العوامات" في الوسطيات النادرة. "تعويم" - أنبوب زجاجي مع زجاج ملحوم ، حيوان شاق ، بحيث قبل التعقيم يضعون أنبوب اختبار من المنتصف (الشكل 18).
أرز. 18. نشاط Vivchennya tsukrolytic للكائنات الحية الدقيقة. I - "صف السلسلة": أ - وسط مع الكربوهيدرات ومؤشر Andrede ؛ ب - على غرار الوسط مع مؤشر BP: 1 - الكائنات الحية الدقيقة لا تخمر في الكربوهيدرات ؛ 2 - الكائنات الحية الدقيقة التي تتخمر في الكربوهيدرات من المحاليل الحمضية ؛ 3 - الكائنات الحية الدقيقة التي تتخمر في الكربوهيدرات مع الحمض والغاز المذاب ؛ الثاني - مستعمرات الكائنات الحية الدقيقة التي لا توضع (bezbarvnі) وتضع اللاكتوز
بالإضافة إلى ذلك ، يظهر نشاط حال السكريات على وسائط Endo و EMC و Ploskireva. الكائنات الحية الدقيقة ، تخمر حمض اللاكتيك (اللاكتوز) إلى الحموضة في وسطها ، تجعل المستعمرة مصابة - يغير الحمض لون المؤشر. مستعمرات الميكروبات التي لا تخمر اللاكتوز تكون قاحلة (الشكل 18).
ابتلع الحليب مع نمو الميكروبات التي تخمر اللاكتوز.
مع نمو الكائنات الحية الدقيقة التي يوتفوريوت أميليز ، في منتصف النشا ، يتحلل. إنهم يعرفون ذلك ، بعد أن أضافوا اسبرط لوغول إلى الثقافة ، فإن لون الوسط لا يتغير. يتم إعطاء النشا غير المتحلل من cym rozchinom blue farbuvannya.
قوة تحلل البروتين(لهذا الغرض ، فإن القدرة على تقسيم البروتينات ، والببتيدات ، وما إلى ذلك) تنمو على الوسائط مع الجيلاتين والحليب والسيروفاتكا والببتون. عند النمو على الوسط الجيلاتيني للميكروبات ، التي تخمر الجيلاتين ، ينمو الوسط. تختلف طبيعة التوزيع الذي تسميه بكتيريا مختلفة (الشكل 19). الميكروبات التي تكسر الكازين (بروتين الحليب) ، تستدعي تنعيم الحليب - يبدو مثل حليب الصقلاب. عند تقسيم البيبتون ، الإندول ، الدورة الدموية ، الأمونيا يمكن رؤيتها. يتم تثبيت المصباح لمساعدة أوراق المؤشر. تم رش ورق الترشيح مؤخرًا بالورود الغنائية ، المعلقة ، المخططة بإناث ضيقة مع دوزينا من 5-6 divs ، وبعد زرع الثقافة على MPB ، يتم وضع فلين بينها وبين جدار أنبوب الاختبار. بعد الحضانة في الثرموستات ، تكون النتيجة مضمونة. يتحول Ammiac إلى اللون الأزرق على ورق البردي ؛ عندما ترى sirvodnya على الفلفل الحلو ، تسربت 20 ٪ من خلات الرصاص وبيكربونات الصوديوم ، يتم إذابة كبريتات الرصاص - البابريكا السوداء ؛ إندول فيكليكا بابريكا أسود ، مسرب بحمض الأكساليك (div. fig. 19).
Krіm zaznachenih sredovishch ، zdatnіst mikroorganіzmіv rasplyuvatі vіznі zhivnі ركائز vyznachayut لمساعدة الأقراص الورقية ، وتسريب كواشف الأغاني (أنظمة مؤشر الورق "SIB"). يتم خفض الأقراص بالقرب من أنبوب الاختبار بالثقافة النهائية وبعد 3 سنوات من الحضانة في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية ، قم بتغيير لون الأقراص للحكم على توزيع الكربوهيدرات والأحماض الأمينية والبروتينات ، إلخ.
القوة الانحلالية (تطور كريات الدم الحمراء) تنمو في منتصف الدم. تصبح بعض الوسطيات واضحة من تلقاء نفسها ، ولكن في الوسط الضيق للمستعمرة توجد منطقة واضحة (الشكل 20). عند الموافقة عليها من قبل methemoglobin ، يكون الوسط أخضر.
حفظ المحاصيل
Vidileni و vyvchenі kultury (shtami) ، scho لتصبح ذات قيمة للعلم أو virobnitstva ، مأخوذة من متاحف الثقافات الحية. يقع متحف الاتحاد السيادي في المعهد الوطني السيادي للتقييس والتحكم في المستحضرات الطبية البيولوجية. L. A. Tarasevich (DIBK).
Zavdannya zberіgannya - pіdtremati zhittєzdatnіst microorganіzmіv і أمامك їх іх мілівії. لمن تحتاج إلى الاسترخاء ، أو إضافة تبادل في الخلايا الميكروبية.
يعد التجفيف بالتجميد من أكثر الطرق تقدمًا للحفاظ على المحاصيل - حيث يسمح التجفيف في فراغ من مطحنة مجمدة بإنشاء معسكر للتشبع. يتم تنفيذ التعليق على أجهزة خاصة. تخزين الثقافات في أمبولات محكمة الغلق عند درجة حرارة 4 درجات مئوية ، ويفضل -30-70 درجة مئوية.
إعادة اختراع المحاصيل المجففة. قم بتسخين طرف الأمبولة بقوة في نصف قمر وألصقها بقطعة قطن جديدة ، ثم انقعها قليلاً بالماء البارد ، بحيث يتم إنشاء شقوق صغيرة على الطيات ، والتي من خلالها يمكن اختراق منتصف الأمبولة. مع هذا ، مرورا بالحواف المتشققة للشقوق ، سيتم تعقيمها مرة أخرى.
* (إذا كان هناك الكثير من الماء على السدادة القطنية ، فيمكنك شربها في الأمبولة وتدمير عقم المزرعة: تتبلل من خلال الشقوق الدقيقة التي تم إنشاؤها ، لذلك يوجد فراغ في الأمبولة.)
احترام! لا تنس أن الأمبولات المختومة بها فراغ. بمجرد فركها من خلال الفتحة الكبيرة ، قد تنتشر الثقافة الموجودة في الأمبولة وستخرج.
السماح لك بالرؤية في الهواء ، مع وجود زوج من الملقط ينكسر ويزيل الجزء العلوي من الأمبولة. قم بحرق الفتحة والبسترة برفق باستخدام ماصة معقمة ، أو أضف مرقًا أو مرقًا متساوي التوتر في الأمبولة باستخدام حقنة. امزج الأمبولات معًا وزرعها في الوسط. يمكن أن يكون نمو محاصيل جديدة في المحاصيل الأولى أكثر شيوعًا.
يمكن أيضًا الحفاظ على الثقافة على المدى الطويل باستخدام النيتروجين النادر (-196 درجة مئوية) مع ملحقات خاصة.
طرق الحفظ غير التافه للثقافات هي كما يلي: 1) الزراعة الفرعية (إعادة الزرع الدورية في وسط جديد) على فترات لتكمن في هيمنة الكائنات الحية الدقيقة ووسط وعقول الزراعة. تؤخذ الثقافات الوسيطة عند 4 درجات ؛ 2) المدخرات تحت كرة olії. تتم زراعة المزرعة في حامل آجار بارتفاع 5-6 سم ، ويتم سكبه بزيت الفازلين المعقم (كرة زيتون حوالي 2 سم) وتخزينها عموديًا في الثلاجة. شروط الحفاظ على الكائنات الحية الدقيقة المختلفة في مختلفة ، من أنابيب الاختبار بشكل دوري شنق الثقافة ، من أجل التحقق من الحياة ؛ 3) التخزين عند -20-70 درجة مئوية ؛ 4) الجمع من أنابيب الاختبار محكمة الغلق. إذا لزم الأمر ، يتم أخذ المادة وتعليقها في مركز جديد.
مراقبة التغذية
1. ما الذي يجب تضمينه في فهم "البحث البكتريولوجي"؟
2. ما نوع الثقافة التي يمكن أن تكون لمثل هذه المتابعة؟
3. ما هي مستعمرة بكتيرية ، ثقافة ، سلالة ، استنساخ؟
4. ما هو فهم "القوة الثقافية للميكروبات"؟
إدارة
1. تعلم ووصف اسبرط المستعمرات. Reseed لهم من أجل ميل أجار لكل قطاع.
2. Vivechit ووصف طبيعة النمو - الثقافة على أجار مائل. النظر في نقاء وتشكل الثقافة في التحضير الملقح.
3. نقل الثقافة من أجار مائل إلى مرق ووسط التشخيص التفاضلي. تحقق واكتب في البروتوكول طبيعة نمو الثقافة على هذه الوسائط والقوة الأنزيمية.
مرق M'yasopeptonny و m'yasopeptonny agar هما أبسط الوسائط الحية المضافة إلى معظم البكتيريا. المادة الرئيسية لتحضير هذه الوسائط الحية وغيرها هي ماء اللحم ، وهو اللون الأصفر للأرض الأصلية مع تفاعل حمضي. ماء معيصنا للانتقام من الكلام الأبيض (الزلال) واستخراج الكلام والملح النشط.
ماء اللحم وتركيزات مرق اللحم البقري (وفقًا لـ GOST 10444-63)
M'yaso yaloviche أو kіnské بعد إزالة الفرشاة ، يتم تمرير الدهون والأوتار عبر مفرمة اللحم ، ويُسكب اللحم المفروم بماء الصنبور البارد ، ويصب 500 غرام من اللحم المفروم في 1 لتر من الماء على الجلد. بعد خلط الكمية ، يقومون بتسخينها حتى درجة الغليان ، ثم يتم تسخينها لمدة 1.5 سنة. يمكن سلق كمية صغيرة من اللحم المفروم مع الماء (حتى 5 لتر) على نار ساخنة مع التحريك كثيرًا حتى لا تحترق جزيئات اللحم الجافة.
الكمية الكبيرة أفضل من الغليان في القدور بقميص البخار. يعود سبب جاهزية ماء اللحوم إلى تصفية كمية صغيرة منها في أنبوب اختبار من خلال مرشح ورقي. ياكشو بروزوري الترشيح ، ماء اللحم جاهز. إذا خرج المرشح kalamutny ، فإن الخطوة التالية هي doti ، فإن الأرصفة لا ترى مرشح prozory. بعد انتهاء الطهي ، يتم غلي الوطن من خلال القماش أو الشاش المطوي مرتين ، ويتم إخراج موطن سيك وأوتريمان بالكامل من اللحم المسلوق لإحضار الماء المغلي إلى حجم قطعة خبز. ليس من الضروري إضافة كمية كبيرة من الماء ، لأنه نتيجة لسلق اللحم ، سوف يمر الماء الكثير من العصير من اللحوم. فقط في حالة وجود متغير عاصف للغاية ، ذلك القوس من الدمل الصاخب ، هناك تبخر كبير للإشعاع.
يُسكب ماء لحم أوتريمان في برطمانات زجاجية ، ثم يُغلى ويُعقم في الأوتوكلاف لمدة 20 دقيقة عند درجة حرارة عادية تبلغ 120 درجة مئوية. من ماء اللحم الذي يتم حصاده بهذه الرتبة ، إذا لزم الأمر ، قم بإعداد وسيلة الحياة اللازمة.
لتقليل تركيز مرق ببتون اللحم (MPB) ، أضف 10 جم من الببتون و 5 جم من كلوريد الصوديوم إلى 1 لتر من ماء اللحم. اجلب تفاعل الوسط إلى درجة الحموضة 7.0-7.2 ، ثم غلي ، ترشح من خلال مرشح ورقي ، صب في أنابيب اختبار نظيفة وأغلقها باستخدام سدادات قطنية ، وقم بتعقيمها في الأوتوكلاف لمدة 20 دقيقة عند درجة حرارة 120 درجة مئوية.
تربية حساء m'yasopeptonny
يتم تحضير ماء اللحم بنفس الطريقة ، كما هو الحال بالنسبة للمرق المركز ، وبدلاً من 500 غرام من اللحم المفروم ، يتم أخذ 250 غرام من اليوغو لكل 1 لتر من الماء. من الممكن تخفيف ماء اللحم المركز المحضر إلى vdvіchі. أضف 5 جم من الببتون ، و 2.5 جم من كلوريد الصوديوم إلى 1 لتر من ماء اللحم المخفف ، واضبط درجة الحموضة إلى 7.0-7.2 ، واتركها تنضج بنفس الطريقة ، كما هو الحال عند تحضير مرق اللحم الببتون المركز.
مرق الريبوبتون
في المصانع التي تصنع الأسماك المعلبة ، يمكن معالجة مياه اللحوم المستخدمة في تحضير الوسائط بماء السمك. يجب تحضير ماء الريبنا من الريبي الرقيق العظيم. أفضل ل cієї التقى سمك الفرخ ، وسمك القد والبايك. يتم تمرير Zvіlnenu vіd kіstok والربا الدهني عبر مفرمة اللحم ويُسكب بماء الصنبور البارد من إكليل الجبل 1 لتر من الماء لكل 500 جرام من السمك المفروم. جميع العمليات الأخرى لتحضير ماء السمك مماثلة لتلك الخاصة بتحضير ماء اللحم.
يتم تحضير ماء ريبنا لتحضير مرق الريبوببتون. للحصول على لتر واحد من ماء السمك ، أضف 10 جم من الببتون ، و 5 جم من ملح المطبخ ، ثم قم بتعقيم الأس الهيدروجيني 7.0-7.2 وتعقيمه كما هو ، مثل مرق ببتون اللحم.
يتم صب المرق في أنابيب الاختبار (قبل التعقيم) من خلال كأس من العذراء ، وفي نهايته يتم وضع أنبوب اللثة بطرف وقبضة مورا (الشكل 52). قم بلف رأس الإسبرط عند سكبه في أنبوب اختبار ، بحيث لا يتم ترطيب حواف أنبوب الاختبار بالمرق ، وإلا فإن سدادة القطن تجف إلى النقطة وقد تنبت بواسطة الكائنات الحية الدقيقة.
ردود الفعل المثبتة للوسائط الواهبة للحياة
مع النتائج الميكروبيولوجية ، من الضروري الحفاظ على حموضة وقوة البيئات الحية. تنشط حموضة الركيزة الحية ، كما كان من المفترض أن تكون ، ذات أهمية كبيرة في العمليات الحياتية للميكروبات: فهي تضيف نموها وقوتها المورفولوجية والفسيولوجية. بالنسبة لمعظم البكتيريا ، هناك حاجة إلى وسيط برقم هيدروجيني 7.2-7.4 ، للخمائر وعدد كبير - مع درجة حموضة 4.5-5.5.
تعود حياة الوسط ، التي تم إعدادها لإظهار القوى الكيميائية الحيوية للميكروبات ، إلى أم التفاعل الأمثل والمخصص بدقة لهذا الميكروب. ضبط الرقم الهيدروجيني للوسط المحضر في المختبر الميكروبيولوجي يمكن أن يكون إما طرق قياس كهربائية أو لونية. كهربيًا ، يتم تحديد الأس الهيدروجيني بمساعدة مقياس الأس الهيدروجيني المختبري (على سبيل المثال ، LP-58 - الشكل 53) أو الأيونومير (KFV-I1 - الشكل 54).
من أجل قياس قيمة الرقم الهيدروجيني لوسط التنشيط الإضافي لمتماثر شارد إضافي ، صب حوالي 40 مل من الوسيط في القارورة ، واملأها بخرطوشة بعنصر من الفضة والكلور وأضف ملحقًا كهربائيًا. تتحرك أسهم الجلفانومتر وتظهر قيمة الأس الهيدروجيني.
عند استخدام مقياس الأس الهيدروجيني المختبري (LP-58) ، يكون من الأسهل إيقاف الزجاج وقطب الكالوميل. يمكن أن تكون الكيس المصنوع من قطب كهربائي زجاجي جدرانًا رقيقة - 0.03-0.05 مم ، لذلك عند العمل بها ، يجب أن تكون حذرًا. قبل تركيز الزجاج ، يجب الاحتفاظ بالإلكترود في الماء المقطر لمدة 1-2 سنوات على الأقل ، وفي حالة التشغيل المتكرر ، من الضروري الاحتفاظ به في الماء المقطر ، واستبداله بشكل دوري بالمياه العذبة.
قبل ضبط الأس الهيدروجيني باستخدام قطب كهربائي زجاجي ، قم بتصحيح مقياس الأس الهيدروجيني للعازل. روزماري قد يكون الرقم الهيدروجيني للنطاق المخزن قريبًا من الرقم الهيدروجيني للنطاق المحدد. يتم ضبط معوض درجة الحرارة للملحق على درجة حرارة نطاق المخزن المؤقت ويضبط الضبط وجزء الجهد من الملحق خلف العنصر العادي. ثم ، بعد شطف القطب بالماء المقطر ووعاء vimiryuvalny ، قم بإشباعه بالوسط المتبقي وقم بتخفيف الأس الهيدروجيني للوسط ؛ اضبط معوض درجة الحرارة على درجة حرارة الوسط والضغط على الزر لتشغيل الملحق الموجود على الدوشتسي الأمامي لمقياس الأس الهيدروجيني ، ضع علامة على مؤشر أسهم الجلفانومتر على مقياس الأس الهيدروجيني. تم وصف القواعد التفصيلية لـ corystuvannya و nalashtuvannya ومشاهدة الملحقات في الإرشادات الخاصة بكيفية الإضافة إلى الملحقات. تفاهة التحليل 3-5 دقيقة. تقرير النتائج بدقة.
كهربيًا بمساعدة مقياس الأس الهيدروجيني والأيونومير ، يمكنك أيضًا التحقق يدويًا من الرقم الهيدروجيني للوسائط المعدة. عند تحضير الركائز الحية للتحليلات البكتريولوجية ، من الضروري ضبط مستوى الأس الهيدروجيني للوسط ، ولإحضار التفاعل إلى أعلى قيمة ، فإن طريقة القياس اللوني العملية ستثبت فعاليتها.
يعتمد أساس طريقة القياس اللوني على قوة المؤشرات لتغيير تركيزها عن طريق تغيير تركيز أيونات H-ion. بالنسبة لمؤشر الجلد ، يتغير النطاق المميز للأس الهيدروجيني في نطاق أي لون واحد. وفقًا لـ GOST 10444-63 ، لإنشاء الرقم الهيدروجيني للوسائط الحية ، يجب إضافة 0.04 ٪ من البرومثيمول الأزرق. نطاق اللون الأزرق البرومثيمول هو 6.0-7.6. في الوسط الحامض ، تمتلئ الكروم بالأصفر zabarvlennya ، في البرك - الزرقاء. عند درجة الحموضة 7.1 ، فإنه يعطي غزوًا أخضر-أخضر فاتح.
لغرض تفاعل المنتجات الوسيطة أو المعلبة ، بعد تطوير الكائنات الحية الدقيقة فيها ، تمت إضافة 0.04 ٪ من مركبات بروموكريسولبوربور. يغير Bromocresolpurpur التلوث في نطاق الأس الهيدروجيني من 5.2 إلى 6.3. في الأوساط الحامضة ، يكون النبيذ أصفر باهت ، وفي الأنواع المحايدة - أحمر بنفسجي ، وعند درجة الحموضة 6.3 يعطي اللون الأخضر مع صبغة أرجوانية من zabarvlennia.
يتم إعداد المؤشرات في الترتيب التالي: يتم فرك 0.1 جرام من مؤشر قابل للتطبيق ، المسمى على تيريس تحليلي ، في المحور (باجزانو عقيق) من 1/20 ن. الصودا الكاوية. لتوزيع 0.1 جرام من برومثيمول بلاكيت ، خذ 3.2 مل من 1/20 ن. فرق هيدروكسيد الصوديوم. لتوزيع 0.1 جم برومكريسولبوربور - 3.7 مل 1/20 ن. فتح المرج. أضف 250 مل من الماء المقطر إلى محلول البركة النهائي وأضف 0.04٪ من محلول المؤشر. يجب أن تؤخذ الاستعدادات لتطوير المؤشر في البرد من الأوعية الزجاجية مع الفلين الأرضي.
قبل التعقيم ، يجب تعديل الأس الهيدروجيني للوسيط ليصبح مساوياً (7.0-7.2). للقيام بذلك ، يتم سكب قارورة كبيرة (2-3 لتر) في 1.5 لتر من وسط المعيشة. من السحاحات الموجودة بها ، ابدأ في سكب 10٪ من محلول بيكربونات الصودا بالتنقيط قطرة قطرة أو محلول ضعيف إلى المرج (على سبيل المثال ، 0.1 نيوتن من محلول هيدروكسيد الصوديوم) ، طوال الوقت في كل تفاعل للوسط وفقًا لـ مؤشر (في هذه الحالة ، وفقا لبرومثيمول الأزرق). لهذا الغرض ، على بلاط البورسلين الأبيض (من الممكن عمل كاتشيلنا) ، قم بتطبيق مجموعة من البقع في المنتصف ، والتي تضيف إليها بقعة من المؤشر. إذا كان اللون الأزرق البرومثيمول ، عند إعطائه zhovte zabarvlennya ، فإن ضخ الصودا أو المرج يحتاج إلى مواصلة doti ، لا تتعطل أحواض منتصف النهار في قطرات المؤشر بألوان خضراء فاتحة. إذا ظهرت نغمة خضراء-زرقاء في قطرات الوسيط المتبقي عند إضافة المؤشر ، فيجب إضافة لون البركة ، عند المعايرة ، التدفقات الزائدة إلى داخل القارورة مع المنتصف ، حياة أعذب ، ولم تتم معايرتها بعد -إعطاء وسيط وسيعاد اكتشاف رد الفعل.
تثبت نفسها بشكل مثالي في الممارسة العملية بمساعدة المقارن ومقياس ميكايليس القياسي. يجب أن تكون هذه الطريقة دقيقة - يختلف تفاعل الوسط حتى 0.1 وحدة من الأس الهيدروجيني. لتحديد الرقم الهيدروجيني للوسيط للملحق الإضافي لـ Michaelis ، من الضروري تجاوز تفاعل الوسط الخاص بعباد الشمس الفلفل الحلو المساعد ، حتى تعرف ، مثل هذا المؤشر ، مثل عدد الأمبولات من ملحق Michaelis يجب تسريعها. نظرًا لأنه بالنسبة لمعظم الوسائط الحية ، يكون التفاعل المحايد ومنخفض التجويف (pH 7.0-7.2) ضروريًا ، فمن الضروري أخذ مؤشر methanitrophenol وعدد من الأمبولات برقم هيدروجيني 6.8-8.2. أثناء التعقيم ، يجب أن ينخفض الرقم الهيدروجيني للركيزة بمقدار 0.2 وحدة ، لذلك من أجل تكوين العقول المثلى لنمو الكائنات الحية الدقيقة قبل التعقيم ، فإن الوسط ، الذي يتم تحضيره ، هو خطأ الأم ، الرقم الهيدروجيني 7.2-7.4.
بعد إعادة فحص تفاعل الوسط وفقًا لعباد الشمس واختيار مؤشر ، خذ مقارنًا ، وقم بتركيب أمبولات قياسية مع الرقم الهيدروجيني الصحيح في أنبوب اختبار جديد (الشكل 55). في أنبوب اختبار آخر من الصف الأول (رقم 2) ، عند المقارنة ، يتم سكب 2 مل من آخر وسيلة تنشيط ؛ هنا ، أضف 4 مل من الماء المقطر و 1 مل من محلول 0.3 ٪ من المؤشر المحدد (يسمى ، كما ذكرنا سابقًا ، ميثانيتروفينول). في أنبوبي الاختبار المتطرفين للصف الأول رقم 1 و 3 ، يتم سكب 2 مل من وسط التنشيط و 5 مل من الماء المقطر. في الأنبوب الأوسط للصف الآخر رقم 5 ، ضع 7 مل فقط من الماء المقطر. في المنفذين المتطرفين للصف الآخر للمقارن رقم 4 و 6 ، أدخل أمبولات بمدى قياسي من مؤشرات الأس الهيدروجيني ، في الفترة الفاصلة التي يتم فيها استعادة تفاعل الوسط.
النظر إلى أنابيب اختبار الضوء من خلال الفتحة السفلية في المقارنة على لوحة بيضاء غير لامعة ، ممسوحة فوق zabarvlennya dosledzhuvannya rodini من مؤشر zabarvlennyam. إذا تم أخذ التلوث في العينة بالوسيط من تلوث المؤشر في أمبولة واحدة ، فإن قيمة الأس الهيدروجيني للوسيط تساوي قيمة الرقم الهيدروجيني لهذه الأمبولة القياسية. إذا ظهر لون الوسيط النهائي (في عينة أخرى) أفتح ، أقل في الأمبولة القياسية ، فإن أنبوب الاختبار مع الوسيط يضاف قطرة قطرة بنسبة 10٪ من كمية بيكربونات الصودا أو 0.1 ن. rozchin їdkogo natra ، microburette vikoristuuuuchi لهذا الغرض. ضخ المتغيرات ، التي تحيد ، تسقط بنقاط الإسقاط ، حتى لا يتطابق لون العينة مع اللون في أمبولة واحدة. للحصول على كمية معينة من المليلتر من الصودا abolugu ، مخططة لتعادل 2 مل من الوسط (يتم وضعها في أنبوب الاختبار رقم 2) ، لا يهم ، فأنت بحاجة إلى بضعة مليلتر من كمية التعادل لضبط مستوى الأس الهيدروجيني في التحضير الإجباري الكامل للكائن الحي.
في البيئات شديدة الحموضة ، يتم تخصيص قيمة الرقم الهيدروجيني للمؤشر الإضافي بارا نيتروفينول. يقوم فريق rozchini іndikatorіv بإعداد الرتبة القادمة.
1. يتم خلط 0.3 جم من ميتا نيتروفينول في 100 مل من الماء المقطر (تتراوح قيمة الأس الهيدروجيني من 6.8 إلى 8.4).
2. يتم إذابة 0.1 جم من بارا نيتروفينول في 100 مل من الماء المقطر (تتراوح قيمة الأس الهيدروجيني من 5.4 إلى 7.0).
يمكنك أيضًا تعيين قيمة تقريبية للأس الهيدروجيني للوسيط بمساعدة مؤشر عالمي. لهذا الغرض ، صب 2-3 مل من الوسيط الأخير في كوب خزفي وأضف 2-3 قطرات من مؤشر عالمي. بعد خلط المجموع بعصا زجاجية ، قم بتدخين لون سرب الأسراب على مقياس ألوان الورق. سيكون الرقم الهيدروجيني للوسيط النهائي هو نفسه كما هو مبين في الأنثى المتساوية في مقياس الألوان. تقترب درجة دقة تخصيص الأس الهيدروجيني بواسطة مؤشر عالمي من 0.5.
تحضير لحم ببتون أجار (MPA)
Agar (في لغة الملايو "هلام") هو كلام عضوي قابل للطي ، مأخوذ من طحالب البحر. يوجد خلف المستودع الكيميائي للنبيذ كمية من الكربوهيدرات ، والتي يمكن رؤيتها حتى السكريات - مثل الجالاكتوز - وقد ترغب في البناء. تعطي الإضافات إلى أجار متوسط نادر سماكة لدرجة أن الذوبان أكبر من درجة حرارة الغليان. يذوب أجار في الماء عند حوالي 80-86 درجة مئوية ، ويصعب عند 36-40 درجة مئوية. يمكن زراعة الميكروبات Zavdyaki tsoma على وسط أجار لأي درجة حرارة تسمح لها بالعيش.
يتم تحضير أجار ببتون اللحم من مرق ببتون اللحم المركز. في دورق Erlenmeyerivsk كبير بطبقة مقاومة للصهر ، تصل السعة إلى 2 لتر ، محكم الإغلاق بسدادة قطنية ، صب تركيزات مرق m'yasopeptonny ، أضف 2 إلى 4 ٪ (مجموعة متنوعة من الودائع) من الآجار المفروم جيدًا ، دون التقويس باستخدام سدادة ، ضع سدادة ضعيفة.
يجب تناول مرق الببتون بتفاعل متوسط 7.4 ، بحيث ينخفض الرقم الهيدروجيني أثناء التعقيم بمقدار 0.2. يمكن تثبيت تفاعل أجار m'yasopeptone إذا ظهر خارج الذوبان. إذا كان الأجار ذو لزوجة جيدة ولا يترسب ، فبعد ضبط الأس الهيدروجيني ، يغلي لمدة 12-15 دقيقة ، ثم يُرشح من خلال الصوف القطني ويُسكب في القارورة أو أنابيب الاختبار (إيداع للاستهلاك) ، ثم يُعقم في الأوتوكلاف لمدة 20 دقيقة عند 120 درجة مئوية.
إذا لم يكن أجار تطهيرًا كافيًا ، فيمكنك الحصار. في أي حال ، قبل التعقيم ، يجب توضيح أجار m'yasopeptone. لهذا ، حتى يذوب ويبرد إلى 50 درجة مئوية ، أجار ببتون اللحم ، أضف بياض البيض ، واخلطه مع 30 مل من الماء واضرب حتى أصبح دبوسًا. للحصول على لتر واحد من المتوسط ، خذ بروتين بيضة دجاج واحدة. يجب أخذ Agar على محمل الجد عند إدخال البروتين ووضعه في الأوتوكلاف لمدة 10 دقائق عند 120 درجة مئوية. تحت ساعة الغليان ، يحترق البيض ويخنق جميع الأجزاء المهمة. بعد التعقيم ، يتم ترشيح الأجار من خلال مرشح شاش قطني. لمن ، خذ كأسًا من العذراء بقطر كبير ، واسحب الشاش فوقه ، وضع كرة رقيقة من الصوف القطني على الحيوان. قم بترشيح أجار الغليان حسب الحاجة بسرعة وقم بالترشيح حتى يتم اكتشافه وهو يصب في أنابيب اختبار سعة 5-10 مل. يتم تعقيم الوسط في الأوتوكلاف ، كما هو موضح أعلاه.
بعد تعقيم أنابيب الاختبار بالوسط ، والتي يجب استبدالها بـ 5 مل من أجار ، ضعها في المخيم المريض حتى لا يبرز الأجار من الفلين. بعد القبض عليهم ، يكتسبون أجار "مائل" (أو مشطوف). توضع أنابيب الاختبار التي تحتوي على 10 مل من الأجار على حامل ثلاثي القوائم وتُسمح لها بالتقاطها وإزالة الوسط والسكب على "طاولة عالية". لا ينصح باستخدام أجار الانحراف لأكثر من 4-7 أيام ، وشظايا النبيذ معلقة.
أجار بيبتون اللحم هو الوسيلة الرئيسية الواهبة للحياة ، والتي يتم تعويضها خلال التحليلات البكتريولوجية في المختبرات الميكروبيولوجية. يمكنك التغلب عليه مثل "أجار بسيط" ، مثل هذا: بعد إضافة الكربوهيدرات ، مما يجعل وسطًا معقدًا للتشخيص التفاضلي.
العيش في المنتصففي علم الأحياء الدقيقة ، قاموا بتسمية الوسائط ، والتي تختلف عن الجانب القابل للطي لمستودع بسيط ، مثل zastosovuyutsya لتكاثر البكتيريا والكائنات الدقيقة الأخرى في العقول الصناعية المختبرية.
جاهز للحياة في المنتصفمن منتجات المخلوق عدد من المغامرات المتزايدة. أهمية كبيرة في الوسط الواقي للحياة لعوامل النمو التي تحفز عمليات التمثيل الغذائي للخلايا الميكروبية (فيتامينات المجموعة ب ، وحمض النيكوتين ، وما إلى ذلك).
قطعة وسائطتحضير وصفات الغناء من دفعات مختلفة أو من رحلة محلول ملحي و aboroslyne إلى إضافة الأملاح غير العضوية والكربوهيدرات والخطابات النيتروجينية.
في الممارسة البكتريولوجيةفي أغلب الأحيان تكون الوسائط الجافة التي تمنح الحياة ، والتي يتم الحصول عليها على أساس التكنولوجيا الحيوية الحالية. Для їх приготування використовують економічно рентабельну нехарчову сировину: що втратили термін придатності кровозамінники (гідролізин-кислотний гідролізат крові тварин, амінопептид - ферментативний гідролізат крові; продукти біотехнології (кормові дріжджі, кормовий лізин, виноградне борошно, білколізин). часу, зручні при транспортуванні та мають مستودع قياسي مرئي.
من أجل الاتساقيمكن أن تكون مراكز الحياة نادرة ، napіrіdkie ، schіlniy. يتم تحضير الوسائط الأخرى بمسار لإضافة 1.5-2٪ أجار إلى وسط نادر ، على سبيل المثال - 0.3-0.7٪ أجار. Agar هو نتاج معالجة نوع خاص من الأعشاب البحرية ، يذوب عند درجة حرارة 80-86 درجة مئوية ، ويكون أصعب عند درجة حرارة قريبة من 40 درجة مئوية وفي حالة التجميد يكون هناك سمك متوسط. في بعض الحالات ، يتم استخدام الجيلاتين (10-15٪) من أجل استخراج الوسيط الواهب للحياة الصلبة. عدد من وسائل المعيشة الطبيعية (مصل الدم المحروق ، بياض البيض المحروق) عبارة عن أسقلوب.
لغرض الاعترافتنقسم الوسيطة إلى التشخيص الرئيسي والانتقائي والتفاضلي.
حتى العناصر الرئيسية ، يمكن للمرء أن يرى الوسطاء ، وهو zastosovuetsya لنمو البكتيريا الغنية. هذه عبارة عن تحلل تجريبي للحوم أو منتجات الأسماك أو مخلوقات الدم أو الكازين ، حيث يعدون منه وسطًا نادرًا - مرق حيوي وأجار حيوي. هذه الوسطاء هي الأساس لتحضير الوسطاء الدهني المطوي - الدموي والدموي الذي يلبي الاحتياجات الغذائية للبكتيريا المسببة للأمراض.
يتم التعرف على الوسائط الاختيارية الواهبة للحياة من حيث الرؤية الاهتزازية وتراكم الكائنات الحية الدقيقة من نوع غنائي (أو مجموعة غنائية) من المواد ، من أجل الانتقام من ميكروبات خارجية مختلفة. عندما يتم الجمع بين الكائنات الحية الانتقائية ، فإنها تظهر من السمات البيولوجية ، والتي تشبه بيانات الكائنات الحية الدقيقة من عدد أكبر من الكائنات الأخرى. على سبيل المثال ، يرتبط النمو الاهتزازي للمكورات العنقودية الذهبية بزيادة تركيز كلوريد الصوديوم ، ضمة الكوليرا - في وسط البركة بشكل رقيق.
تعد الوسائط التفاضلية التشخيصية التي تمنح الحياة متقطعة لتحديد أربعة أنواع (أو مجموعات) من الكائنات الحية الدقيقة. يعتمد مبدأ تشجيع هذه الوسائط على حقيقة أنه يمكن تمييز البكتيريا المختلفة فيما بينها من أجل النشاط الكيميائي الحيوي بسبب مجموعة غير متساوية من الإنزيمات.
مجموعة خاصة تتكون من مواد اصطناعية وغير اصطناعية تمنح الحياة. يشتمل مستودع الوسائط الاصطناعية على كلام نقي كيميائيًا: الأحماض الأمينية والأملاح المعدنية والكربوهيدرات والفيتامينات. في الوسط الاصطناعي ، تشمل أيضًا الببتون وخلاصة الخميرة والكلام الحي الآخر. غالبًا ما تستخدم هذه الأنواع المتوسطة من قبل الروبوتات المتقدمة علميًا وفي الصناعة الميكروبيولوجية مع اختيار المضادات الحيوية واللقاحات والمستحضرات الأخرى.
في بقية العالم ، وبطريقة إنقاذ الموتى ، فإن التحديد السريع لبعض الكائنات الحية الدقيقة (البكتيريا المعوية ، والمكورات العنقودية ، والمكورات العقدية ، وما إلى ذلك) سيطلق عليه نظام الفحص الدقيق (MTS). الرائحة الكريهة عبارة عن ألواح بوليسترين بها ثقوب ، توضع فيها وسائط تشخيص تفاضلية معقمة. يتم تعقيم MTS عن طريق اختبار الأشعة فوق البنفسجية. تعتبر أنظمة الفحص الدقيق فعالة بشكل خاص في حالة الدراسات البكتريولوجية الضخمة في المختبرات العملية.
ويموجي إلى الوسط الحي
سواء كان وسيطًا واردًا للحياة ، يمكن طمأنته من خلال تطوير vimog: انتقم من كل ما هو ضروري لاستنساخ الكائنات الحية الدقيقة في الكلام في شكل يسهل التغلب عليه ؛ الأمهات لديهن محتوى مائي مثالي ، ولزوجة ، ودرجة الحموضة ، ولكن متساوي التوتر ويمكن أن يكونا شفافين. يتم تعقيم المادة الواقية للحياة في الجلد بطريقة غنائية بطريقة البور في المستودع.
عند إعداد الوسائط الواهبة للحياة ، من الضروري حماية الحاجة للكائنات الحية الدقيقة المزروعة في عناصر الحياة المختلفة. Іsnuyut تصنيفات مختلفة لوسائل المعيشة.
تصنيف الوسائط الحية خلف المستودع:
1. اغفر للوسط(MPB ، MPA ، الجيلاتين ، ماء الببتون). مرق اللحم ببتون (MPB) هو قاعدة البروتين لجميع الوسائط.
طرق Іsnuє kіlka لإعداد MSB:
أ) على المياه اللحمية من إضافة الببتون النهائي ؛
ب) على هضم نواتج التحلل المائي للشراب الحر مع إنزيمات إضافية.
M'yaso-peptonny agar (MPA) otrimuyut طريقة لإضافة أجار أجار (1.5-3٪) إلى MPB. على سبيل المثال ، تقسيمات MPA على طول قطري أنابيب الاختبار والقوارير هي نفسها حواف أجار. مثل الجزء الأوسط ، يبلغ ارتفاع العينة عموديًا 5-7 سم ، مع حامل أجار. MPA ، اشتعلت في أطباق بتري مثل shtastshki - أجزاء لوحة أجار. مثل الكرة الوسطى ، هناك كرة عمودية بارتفاع 2-3 سم وكرة قطرية من نفس الحجم ، سعر أجار أجار.
2. وسط قابل للطيمحضرة على أساس إضافات الغناء البسيطة (الكربوهيدرات ، الدم ، الزوفش ، البيض ، سيروفاتكا ، الحليب ، الملح ، عوامل النمو أيضًا)
تصنيف الوسائط الواهبة للحياة للمكونات الخارجية:
1. مراكز الحياة الطبيعية- إنه منتج طبيعي لنبات مخلوق أو نامي.
يمكن بوتي:
Roslinnі (منتجات خارجية - فول الصويا والبازلاء والبطاطس والجزر).
المخلوقات (المنتجات الخارجية - اللحوم ، الأسماك ، البيض ، الحليب ، الأنسجة الحيوانية ، الجوفش ، مصل الدم).
زميشاني (MPA ، وسط ليفنشتاين - جنسن توشو).
2. قطعة وسائطلسحب المنتجات الطبيعية المصنعة (ماء اللحوم ، الهضم) ، الكلام ، otrimanі z tsikh produktіv (مستخلصات الببتون والخميرة والذرة) ومضافات مختلفة. المجموعة الأكثر أهمية والأكثر تنوعًا من الوسائط خلف المستودع هي الأكثر ركودًا. يتم تحضيرهم لغناء الوصفات من دفعات مختلفة من تشي في العدد البري للنبات ، مع إضافة الأملاح غير العضوية والكربوهيدرات والخطابات النيتروجينية.
3. الوسائط الاصطناعية(في المستودع الكيميائي المنزلي) تتكون من مخزون نقي كيميائيًا بالتركيزات الصحيحة تمامًا (مع إضافة الكربوهيدرات والأملاح والأحماض الأمينية والفيتامينات وما إلى ذلك). على أساس هذه الوسطاء ، بإضافة الوسطاء الطبيعي أو المقطوع إليها ، يكتسبون الوسطاء الاصطناعية.
تصنيف الوسائط الحية من أجل الاتساق:الوسطاء buvayut نادر(وسائط بدون أجار) ، مثل(مع أجار يصل إلى 1٪) ، schіln(أغاروف - 1.5-2.5٪). غالبًا ما تستخدم الوسائط النادرة لزراعة الخصائص الفسيولوجية والكيميائية الحيوية للكائنات الحية الدقيقة ، لتراكم الكتلة الحيوية ومنتجات التبادل. Napіvridkі seredovishcha يغني نائب іz zberіgannya الثقافات ، shіlnі - vіdіlennya mikroorganіzmіv ، vychennya morphologiії colіnіy ، dіgnostіchnyh іlіy ، kolіkіsny іnіstchny ، vznihoni
تصنيف وسائل المعيشة لأغراض التعرف:عالمي (انتشار) وخاصة.
وسائط عالمية (أساسية).تُستخدم الوسائط القوية لزراعة المزيد من الكائنات الحية الدقيقة nevibagly ، أو كأساس لإعداد وسائط خاصة ، وإضافة الدم والزكور والحليب واللبن وغيرها من المكونات اللازمة لتكاثر تلك الكائنات الدقيقة. مجموعات tsієї تكذب: MPB - مياسو-بيبتون مرق ، MPA - مياسو بيبتون أجار ، MPZH - مياسو-بيبتون جيلاتين رقيق.
وسائط خاصة.يتم تعيين vidilennya والزراعة الانتقائية لأنواع الكائنات الحية الدقيقة الغنائية ، وينمو الياكو على وسائط بسيطة.
توجد مثل هذه الأنواع من الوسائط الخاصة: وسائط الإثراء ، والوسائط الاختيارية ، والتشخيص التفاضلي ، والوسائط المحافظة والتراكمية.
الثروة المتوسطة.لا ينمو الكثير من الكائنات الحية الدقيقة في الوسط الطبيعي ، لزيادة القيمة الحية للوسط ، يضاف إليها في الكربوهيدرات (مرق السكروز أو أجار) أو البروتينات (أجار ومرق سيروفاتكوفي ، أجار الدم والمرق). يتم قطع أجار الدم أو مرق الدم بمسار لإضافة 5-10 ٪ من الدم المعقم منزوع الليف من الخراف والأرانب والحصان والإنسان إلى الوسط الواهب للحياة. يستخدم النائب الأوسط لمراقبة المكورات العقدية والمكورات الرئوية والبكتيريا الأخرى ، وكذلك تطوير نشاط الانحلالي. مرق Sirovatkovy أو أجار رمادي يؤخذ عن طريق إضافة 15-20 ٪ من Kіnskoy أو bichachoї syrovatka إلى الوسائط البسيطة.
2. وسيطة اختيارية (انتقائية).يتم التعرف على هذه الوسائط لتهتز الرؤية وتراكم الكائنات الحية الدقيقة من نفس النوع من المواد ، مما ينتقم من ظهور الميكروبات. عند نشر المادة عليها ، والتي ستنتقم من مجموع الكائنات الحية الدقيقة المختلفة ، سوف نظهر نموًا من هذا النوع ، والذي سيكون الوسيط المعين فيه انتقائيًا. يتم الوصول إلى حيوية الوسط عن طريق خلق العقول ، وهو الأمثل لزراعة الميكروبات الغنائية (درجة الحموضة ، Eh ، تركيز الملح ، تخزين الخطب الحية) ، على سبيل المثال. اختيار إيجابي. طريقة لإضافة إلى منتصف الخطابات ، والتي سيتم تجاهلها من قبل الكائنات الحية الدقيقة الأخرى (zhovch ، تركيزات عالية من كلوريد الصوديوم ، والمضادات الحيوية ، وما إلى ذلك) ، يجب. اختيار سلبي. لمجموعة tsієї للكذب:
وسط سيلينيت- є أفضل أرضية وسط لميكروبات السالمونيلا والدوسنتاريا في سون. السيلينيوم الصوديوم ، الموجود في الوسط ، يحفز نمو هذه البكتيريا ويثبط نمو النباتات المصاحبة.
أجار البزموت الكبريتيتانتقم من الملح في الوحل ، والأخضر الماسي. تنمو السالمونيلا في منتصف الوسط الذي يشبه مستعمرات اللون الأسود. خلاف ذلك ، لا تعطي البكتيريا على النمو الأوسط.
Zhovtkovo-salting agar (JSA)الأرضية الوسطى لمراقبة المكورات العنقودية تصل إلى 10٪ كلوريد الصوديوم ، والذي يأخذ في الاعتبار العدد الأكبر من البكتيريا الموجودة في المادة. بالإضافة إلى ذلك ، يعتبر الوسط أيضًا تشخيصيًا تفاضليًا ، نظرًا لأن وجود صفار البيض يسمح باكتشاف إنزيم الليسيثيناز (lecitovitelase) ، الذي يقتل المكورات العنقودية المسببة للأمراض. يحلل الليسيثيناز الليسيثين إلى فسفور كولين وأحماض دهنية مائية غير تفاعلية ، وهذا هو السبب في أن منتصف مستعمرات الليسيثيناز الموجبة للإيجابية هي منطقة براق في مظهر "الوريد الشعاعي".
مرق اللحم البقريانتقائيًا للسالمونيلا ، يضاف تكاثر هذه المنشطات بنسبة 10 ٪ zhovch ، والتي تؤدي في وقت واحد إلى نمو الكائنات الحية الدقيقة المصاحبة.
أجار البركةأو المياه الببتونية في البركةانتقائي لضمة الكوليرا ، تفاعل البركة للوسط (الرقم الهيدروجيني 9.0) لا يغير من نمو ضمة الكوليرا ، ولكن نمو الجالموي للكائنات الحية الدقيقة الأخرى. 3-5 ديب. F
3. وسائط التشخيص التفاضلي.يجب استخدام وسائط التشخيص التفاضلي للتمييز بين نوع واحد من الكائنات الحية الدقيقة ذات طبيعة مختلفة من نشاطها الأنزيمي. يجب اختيار مستودع هذه الوسائط بمثل هذا rozrachunkom ، بحيث تكشف بوضوح عن الهيمنة المميزة لنوع الكائنات الحية الدقيقة الغنائية ، مع تحديد خصائص تبادل الكلام.
وسط مظهر من الميكروبات zdatnosti الحالة للبروتين والانحلالي ، ينتقم في المستودع الخاص بك من البروتين الكلام: الدم ، والحليب ، والجيلاتين رقيقة. أكثر الوسائط انتشارًا هي الجيلاتين الببتون باللحم (MPZ) ، الذي تم حرقه ، وأجار الحليب والدم (KA).
تشتمل وسائل تطوير قوى الجليكوليك على ثلاثة مكونات رئيسية: قاعدة منح الحياة (مرق ، أجار) ، ركيزة (أحادي السكاريد ، كحول غني) ومؤشر لظهور بعض الإنزيمات. تشق الركائز إنزيميًا لإنتاج قيمة الأس الهيدروجيني التي تغير تركيز الوسط. أوسع نطاق من ألوان الوسط مع الكربوهيدرات المختلفة (على سبيل المثال ، من اللون الأزرق البرومثيمول ، مؤشر BP). يوجد أيضًا على نطاق أوسع هو منتصف Giss ، حيث تحمي التنوع والقدرة على تخمير الكربوهيدرات المختلفة باستخدام المحاليل الحمضية والحمضية والغازية.
من أجل التمايز بين البكتيريا المعوية ، تشبع ماء الببتون بمجموعة من الكربوهيدرات المختلفة ، ومؤشر Andrede ويطفو ، مما يسهل اكتشاف التغويز ويساعد على التحديد البصري للتغيير في الرقم الهيدروجيني ، والذي يميز العديد من الكائنات الحية الدقيقة. Zokrema ، الذي ينكسر في الجانب الحامض ، يتحول إلى احمرار من الوسط بكاشف Andride ، أو pozhovtinnya مع وسط بديل مع البرومثيمول الأزرق ، تمامًا كما هو الحال عندما يتم تعبئته بمؤشر Andrede والبرومثيمول الأزرق ، لا تغير لون الوسط. على سبيل المثال ، فإن مراقبة البكتيريا المسببة للأمراض من الأمعاء تصيب الوسط ، مما يسمح بالتفريق بين الكائنات الدقيقة المسببة للأمراض من سكان ما بعد الأمعاء - الكائنات الحية الدقيقة التي تتحلل من اللاكتوز.
هذا الوسط هو منتصف إندو. المكونات الرئيسية للوسط Endo هي MPA واللاكتوز والفوكسين الأساسي وكبريتيت الصوديوم. في منتصف المكان الواهب للحياة ، تحول المركز إلى لون حمرة فاتحة. عند تخمير اللاكتوز ، يذوب الأسيتالديهيد ، والذي يتفاعل مع الكبريتيت 1 ، الذي يهتز مع غيبوبة ، يحول الفوشين المستعمرات إلى اللون الأحمر الفاتح. لهذا ، فإن العصا المعوية ، لأنها تخمر اللاكتوز ، عند نموها على هذا الوسط ، تنشئ مستعمرات حمراء مع وهج معدني ، والسالمونيلا والشيجل بدون برميل ، بالنسبة لأولئك الذين لا ينتنون ، لا يخمرون اللاكتوز.
4. منتصف التراكم ،في بعضها ، هناك زيادة في عدد الأنواع الفردية من الكائنات الحية الدقيقة.
5. وسائط حافظة (نقل).المعين للمحافظة على الكائنات الحية الدقيقة خلال ساعة النقل القادمة إلى شهر التسليم. يجب أن تهتم هذه الوسائط بالمواد المضافة التي تمنع تكاثر وموت الميكروبات مما ينقذ حياتها. مجموع الجلسرين (متوسط تيغا) ، مجموع الفوسفات العازلة و Kari-Bleyr's ، Amies (مع vugillia المنشط وبدون تنشيط vugillya) ، Stewart and in.
تعقيم الوسائط الواهبة للحياة.
يتم سكب جميع الأوساط الواهبة للحياة بشكل مستقل عن علامتها في أطباق نظيفة ومعقمة. يتم تعقيم معظم الوسائط عن طريق التعقيم بالبخار المضغوط ، ولكن في ظل ظروف مختلفة ، يتم إراحة المستودعات الخاصة بهم.
1. يتم تعقيم الوسائط الاصطناعية وجميع وسائط الأجار ، التي لا ينبغي حفظها في المستودع الخاص للفرد من البروتينات والكربوهيدرات الأصلية ، لمدة 15-20 دقيقة في الأوتوكلاف عند درجة حرارة 115-120 درجة مئوية وضغط من 1-1.5 أجواء.
2. Seredovishcha بالكربوهيدرات والحليب (حتى مستوى اللاكتوز) ، يتم تعقيم الجيلاتين الحي ببخار مباشر عند درجة حرارة 100 درجة مئوية جزئيًا أو في الأوتوكلاف عند 112 درجة مئوية وضغط يصل إلى 1 جو.
3. Seredovishcha ، إلى المستودع الذي يدخل فيه الكلام الأبيض (مصل الدم ، الوطن الأم الاستسقائي) ، يتقلب مع tyndalization أو الترشيح.
4. من أجل تعقيم الأوساط الواهبة للحياة ، والتي يتم حفظها في مستودعاتها الخاصة ، تتم معالجة البروتينات الأصلية بالترشيح من خلال مرشحات غشاء Seitz.
للتحكم في عقم الوسيط بعد التعقيم ، ضع منظم حرارة عند 37 درجة مئوية لمدة 3-5 ديسيبل. تُترك بعض الأجزاء الوسطى من المذنبين مفتوحة ، وعلى السطح عند رفاق الوسطاء الأحياء للأبرياء ، هناك علامات على النمو. للتحكم في العقم ، يتم تحديد التحكم الكيميائي للوسائط المحضرة ، مما يؤثر على حقيقة أن الرقم الهيدروجيني وكمية النيتروجين الكلي والأمين والكلوريدات يتم تحديدها في ملصقات من سلسلة الجلد.
Іsnuє أيضًا التحكم البيولوجي في الوسائط. في هذه الحالة ، تُزرع براعم من الوسط بثقافة معملية لهذا الميكروب ، والتي يتم تحضير الوسط لها ، ويتم زراعة طبيعة نمو اليوجو. فقط بعد ذلك ، كما أظهر الوسطاء السيطرة ، يمكن أن ينتصروا على الاعترافات.
للاعتراف بأماكن المعيشة ، تنقسم الأحياء الوسطى إلى مثل هذه الفئات الرئيسية.
عالمي- متوسطة ، حيث يكون النمو الجيد غنيا بأنواع البكتيريا الممرضة وغير الممرضة. أمامهم يمكنك أن ترى: مرق اللحم بيبتون (MPB = ماء اللحم + 1٪ ببتون + 0.5٪ كلوريد الصوديوم) ، أجار لحم ببتون (MPA = MPB + 2-3٪ أجار).
التشخيص التفريقي- الوسائط ، التي تسمح بعلاج نوع واحد من البكتيريا بأنواع أخرى من النشاط الأنزيمي أو المظاهر الثقافية. أمامهم يمكن للمرء أن يرى الوسطاء من Endo و Levina و Ploskirev و Gissa والعديد من الآخرين.
انتقائي(المرادفات: انتقائي ، انتقائي ، zbagachuvalnі) - برمجيات وسيطة ، والتي تنتقم من الكلام ، والتي تكون نيابة عن الكائنات الحية الدقيقة من النوع الأول ولا تأخذ ، أو تسبب تغييرًا في نمو الكائنات الحية الدقيقة الأخرى. تسمح الوسائط الانتقائية بالاختيار المباشر للبكتيريا من المادة المدروسة. من بين هؤلاء مولر ، سيلينيتوف ، رابوبورت ، 1٪ ماء ببتون وغيرها.
انتقائية تفاضلية- الوسطاء ، والتي ستكتسب قوة الوسطاء التشخيصي التفاضلي والانتقائي. الرائحة الكريهة vikoristovuyutsya ، zokrema ، من أجل التعرف المبكر على ذلك التعرف على البكتيريا ، والتي يمكن رؤيتها لعدد كبير من الأنواع المنتشرة على نطاق واسع من البكتيريا المعوية و pseudomonads (وسط Syvolodsky).
مميز- مواد معدّة خصيصًا لنمو البكتيريا الصامتة حتى لا تنمو ، وإلا فمن السيء أن تنمو على وسط كوني. أمامهم ، يمكن للمرء أن يرى منتصف McCoy-Chapin (لمنع نمو التولاريميا) ، ودم MPA (لمنع نمو العقديات المسببة للأمراض) ، ووسط Levenshtein-Jensen (لـ مراقبة السل من السل) و n.
اصطناعي- وسط مستودع كيميائي مالح ، وهو مصدر للأملاح غير العضوية مع إضافات الحقول الكيميائية ، يعمل الياك بمثابة dzherel من الفحم أو النيتروجين. بعقب مثل هذا الوسط الاصطناعي هو الحد الأدنى من المتوسط M-9 ، حيث الطاقة والكربون عبارة عن جلوكوز ، والنيتروجين هو NH4C1. يمكن أن تكون الوسائط الاصطناعية أكثر قابلية للطي مع تضمين العديد من الأحماض الأمينية والقواعد والفيتامينات.
قيلولة اصطناعية- الوسائط التركيبية ، والتي يمكن الإضافة إليها ، سواء كان منتجًا طبيعيًا ، مثل مصل الدم. هناك الكثير من الخيارات المختلفة للوسائط الحية ، المصممة لتلبية احتياجات الأنواع المختلفة من البكتيريا وأغراض التشخيص.
محرك كهربائي غير متزامن A4 لآليات القيادة التي لا تؤثر على التحكم في تردد الغلاف (المراوح ، مراوح العادم ، المضخات). يمكنك التعرف على خصائص محركات سلسلة A4 وخصائصها على
