Elektivnі zhivilnі средно дупе. Живейте в средата. Захарен агар Чапек-Докс

Избираемите среди са въведени в микробиологичната практика от S.M. Vinogradsky и M. Beyerink. Следователно, животворните среди, добавяйки по някакъв начин едно или повече химически полета, създават оптимални умове за растеж и възпроизвеждане на един вид микроорганизъм (или група микроорганизми от спори) и недружелюбни - за решението. Такива среди са основният ранг на виждане на чиста култура от микроорганизми от зоната на тяхното естествено обитаване и натрупване на маса от култури (химичният метод за виждане на чиста култура). Например животворна среда, тъй като е изгоряла кинска сироватка, селективна среда за дифтерийни бактерии, пептонова вода от локви - за холерен вибрион, бульон от цвекло - за коремен тиф, бульон от черния дроб - за бруцела и др.

Натрупването на микроби в селективни животворни среди в бъгове може да послужи като важна първа стъпка, когато се виждат чисти култури от други вторични материали (например, холерен вибрион или тифоидни бактерии от поддаване на заболявания като цяло).

Какво разбирате за дифиринарно животворната среда?

Диференциално - диагностични носители - това са едни и същи медии, до склада на някакъв крем от речи, които осигуряват растежа и развитието на микроорганизмите, влизат в речта, която zastosovyvaetsya като субстрат за пеене на ензими. Зад субстрата на киселата змия се посочва наличието на този друг ензим (оценява се с помощта на индикатор, който реагира на присъствието на животворна среда при разграждането на субстрата).

Типът на кожата на микроорганизма се характеризира със стабилен набор от ензими. Назначаването на набор от ензими с допълнителни диференциално диагностични среди позволява диференциране на видовете микроорганизми. Например, кръвният агар позволява да се открие ензимът хемолизин, средната Hisa - цукролитични ензими (карбохидраза), желатинът победи също така да преодолее протеолитичните сили на микробите.

Кръвен агар. За наличието на ензима хемолизин се съди по разрушаването на еритроцитите и установената светлинна зона около микробите, израснали върху кръвния агар.

Средно неговото. За наличието на ензими - карбохидраза, които се разлагат на въглехидрати до киселинност, променят рН на средата към киселинната страна и променят цвета на жизнената среда. Використан може да се използва в набор от ензими за повторна проверка на чистотата на културата, която се наблюдава, както и за бързото разграничаване на един вид от други при първия случай на инокулация на инфекциозен материал.

Химически реактиви

1. Какъв вид химическа реактивна е тази, за която се застосова вонята?

Реактивни химикали- Реч, които са победители в лабораторната практика за развитие на различни химични реакции.

Повечето от химическите реагенти са индивидуални речи, проте често смърди в складове. Няма общоприета класификация на химичните реагенти, най-често те се разделят на аналитични химични реагенти по друг начин.

2. При ветеринаря с какъв метод мирише на победата?

Във ветеринарната химия реагентите се използват за аналитични и диагностични цели при клинични, ветеринарно-санитарни, хигиенни, експертни, биохимични и други лабораторни изследвания. Методите на изследване, които се разработват и развиват от биологичната и клиничната практика, изискват голям асортимент от химични реагенти, които са задоволителни и на най-взискателните учени. Например, за клинични и биохимични изследвания, високо пречистените субстрати за ензими, самите ензими, реагентите за специфични групи (SH, NH3, COOH - групи и іn) са тънки. За провеждане на неорганични и органични синтези, както и за киселинни и киселинни анализи, вкл. при ветеринарно-санитарен контрол при различни изследвания, анализи) на медицински изследвания, при ветеринарно-санитарни и хигиенни анализи на личинки, храна, вода и др. vikoristovuyut голям брой от най-универсалните химически реагенти с висока степен на пречистване.

Zukrovy бульон и tsukrovy агарварете по начин, който да добавите към идеалния бульон или разтопен обикновен агар от същото количество въглехидрати в количество от 0,5 до 1%. Въглехидратът се диспергира в малко количество вода и след това се добавя към животворна среда. Стерилизирането на пилешкия бульон и агара се вибрира в апарата на Кох в продължение на 3 дни след 1 година.
Агар с кръв, сивкав или с асцитична родинаприготвя се с дотриман суворой асептика. Към готовия леко разтопен и охладен до 45° агар, разлят в епруветки или бутилки, добавете 20-25% стерилен сироп или асцитичен ридини или 5-25% стерилна дефибринирана кръв. След многократно смесване (за уникално разтваряне на пухирив и пънчета), агарът се отрязва в епруветки и вместо в бутилки се излива в чаши Heidenreich. Бульон от сивкав, асцитичен отечество или кръвгответе точно по този начин, като агар, но без нагряване. За да контролирате стерилността на бульона, настройте термостата за 48 години на 37°.

Диференциално-диагностична животворна среда. Складът е разпознат.

Среден Ендо.Пригответе се безпроблемно, преди да живеете. До 100 ml месо-пептонен агар или агар върху бульон Хотингер (рН 7,6) стерилен добавете 1 g химически чиста лактоза, разтворена в 5 ml стерилна вода, охладете до 70 ° и добавете сумата от 0,5 ml от основния 1 25 ml прясно приготвен 10% разтвор на натриева основа, разбъркайте и изсипете в чаши. За podsushuvannya vіdkritі чаши, поставени на 30 минути на термостат при 37 °.

В средата на Ендо чревната пръчка дава колония с червен цвят с метален оттенък, а бактериите от групата на коремен тиф-паратиф и дизентерия дават колонии без кора.

Структурен ред въглехидрати (средата на Хиса).До 100 ml вода се добавят 1 g пептон, 0,5 g готварска сол. Пептонът и силата се разделят в гореща вода с тънък слой разредител и се филтрират през хартиен филтър (по-ясно виждаме разликата). Възстановяване на pH 7.0. В определената среда се добавя 1% от един от застоялите въглехидрати, поплавъците се спускат на дъното на епруветките, за да уловят газа (за да се каже за дълбокото разделяне на tsukrіv) и се добавя индикатор. Като индикатор за vikoristovuyut:

а) лакмусова тинктура - 5 ml на 100 ml от средата. В кисела среда лакмусовата тинктура показва зачервяване, в локва - синьо;

б) азолитмин, който може да се пречиства с лакмус, и калиева сол (да се добавят 0,25 g азолитмин към 1 л от средата);

в) бромотимолово синьо - на 1 л от средата 1 ml 1,6% алкохолен индикатор (средата е зелена на цвят, синя в заселената ливада, жълта в коригираната киселина);

г) Индикатор на Андре, който се състои от 1 g кисел фуксин, 400 ml дестилирана вода и 64 ml нормален натриев хидроксид. Добавете 1% от индикатора към ревитализиращата среда. Средната част на пробата може да има сламеножълт цвят без еризипелатозен цвят. В кисела среда цветът на средата се променя на червен.

Индикаторът трябва да се даде, за да се определи промяната в реакцията на ревитализиращата среда, която се наблюдава при вливане на ферментация във въглехидрати, т.е. проява на биохимичната активност на микробите. Останалата част от май е от голямо значение за микробиологична диагностика на ниски инфекциозни заболявания (коремен тиф, дизентерия, холера и др.). Средата с въглехидрати и индикатор се излива в стерилни епруветки и се стерилизира с удар при 100° в продължение на 3 дни.

Кратък ред. Промени в растежа на E. coli, S. typhi.

Методи за визуализация на чисти култури от аеробика.

Метод на Дригалски

Изглед на чистата култура на анаероби.

Div praknaviki

Вирусологични методи. Назначаване, принцип.

Вирусологичен метод

Основни етапи:

1. Събиране на готовия материал.

2. Изберете за принципа на цитотропизма и избора на чувствителна тестова система, предназначена за цял живот.

3. Инфекция на избраната система.

4. Индикация на вируса на базата на откриване на його нуклеинова киселина, антигени, хемаглутинин, CPD, включително.

5. Идентификация и титриране на вируса да се извърши на база:

а) обозначаване на антигени във вируса за допълнителни имунологични реакции (RIF, IFA, RPHA, RSK, RN, WIEF и други); б) патологични находки на органи и тъкани; в) CPD; г) клинични симптоми, биологични изследвания (кератоконюнктивални и други).

Методи за откриване на вируси

В случай на заразени с вирус клитинови култури е възможно да се премахнат различни видими прояви на вируса:

1. Цитопатичен към вируса върху културата на клитин (CPD)– виникнения в нея видими морфологични дегенеративни промени;

2. Пристигане на баня, заразена с култура на клитин хемадсорбция- до адсорбцията на еритроцити върху повърхността на клитиновата топка;

3. Осветяване в инфектирана култура на клитин под специална топка, покрита с агар с характерни плаки, които са „отрицателни колонии” от вируси;

4. Вътрешни включвания

Sobi за отглеждане на анаеробни микроби.M'yasopeptonny бульон черен дроб Kita - Taroztsі (MPPB).Пресният или замразен черен дроб (вместо голяма рогата слабиня) се нарязва на пържени шматки, залива се с еднаква маса водоснабдителна вода, вари се продължително време, филтрира се през памук и се добавя до 1 част от отстранения екстракт към 3 части m 'язопептонов бульон. Сумишът се загрява до кипене, добавя се химически чиста кухненска вода (на 1 литър 1,25 g) и рН се довежда до 7,6-7,8, след което се вари 15 минути и се филтрира през хартия или памучна вата. Към филтрирания бульон добавете ситно нарязани смачки (по 1,5-2 g всеки) от черния дроб, 100 g черен дроб на 1 литър бульон (черният дроб се почиства пред плівок и се измива с вода). Поставете цаца от такъв shmatochkiv близо до епруветката, изсипете 7-10 ml бульон с висока чаша, поставете вазелин или парафиново масло върху повърхността му.

Бульонът със скилидки от черен дроб се стерилизира под надземен порок от 0,1 MPa в 30 мин. За изваждане от епруветките, преди сеитба, кипете в средата на деня за 10 минути и се охлажда с вода.

Nap_vridky агар за анаероби. Добавете 0,25-0,75% агар-агар и 1% глюкоза към MPB; среда рН 7,4. Средата се излива с високи купчини при епруветката. Стерилизирайте с чифт пушки за 15-20 минути за 3 дни.

Sobi за отглеждане на млечнокисели бактерии.Мляко (cilisne).Загрейте до кипене. Налейте колба в тръбата и я поставете за 10-20 години на студено място за върховете. След това през кранчето на епруветката изсипете нискомаслената част от млякото в епруветки, затворете с памучни тапи. Стерилизирайте инжекцията при 100 ° C в продължение на три дни по 20 минути всеки или при 112 ° C веднъж за 30 минути.

обезмаслено мляко. За извличането на обезмаслено мляко, неселектираното мляко се отделя и отстранява по същия начин, както в случая с неселектирано неселектирано мляко.

Хидролизирано мляко (за Богданов).Вземете 1 литър сварено іохладено до 45 ° C обезмаслено мляко, възстановете pH 7,6-7,8, добавете 0,5 g панкреатин на прах (разтворен отпред в малко количество топла вода) или 2-3 g фино нарязана подшлункова каша и 5 ml хлороформ през цаца от пух. След тази сол тя се разклаща силно, затваря се силно с коркова запушалка и се поставя за 3 дози в термостат при температура 40°C с леко струсуване на р_дини. След края на определения срок, с метода на отстраняване, сулфатният хлороформ се отстранява, родината се филтрира и се разрежда 2-3 пъти с чешмяна вода. Доведете рН на средата до 7,0-7,2 и стерилизирайте.

Агар от хидролизирано мляко.Добавете 1,5-2% агар към хидролизирано мляко, разтопете го, изсипете го в епруветки и го стерилизирайте при свръхналягане от 0,1 MPa втеглене 15 мин. На тази среда пръчиците с млечна киселина растат добре.

Сироватков агар. За 100 ml чешмяна вода вземете 7,5 g агар, кипете до пълно, добавете вода към обема на кочана (тоест по обем, равен на обема на сварената вода), добавете 400 ml зад разстоянието от приготвения млечен серум, дайте плавен залог в 30-те години, филтрирайте през топче памук, изсипете след епруветки істерилизира се под менгеме от 0,05 МРа с разтягане от 30 минути.

Среда на зелето. 200 г нарязано зеле (или люцерна) се заливат със 100 мл вода и се вари в тенджера 10 минути, изцедени през топче марля. Otriman native се филтрира и разрежда 2 пъти с чешмяна вода. Добавете 2% глюкозит и 1% пептон, изсипете в епруветки и стерилизирайте с три надземни менгеме 0,05 MPa за 15 минути.

Среда за отглеждане на осмофилни дрожди. Приблизително 1 литър дестилирана вода, добавете 200 g мед, 1 g калиев дифосфат, 0,5 g магнезиев сулфат, 0,5 g амониев тартарат, 0,1 g натриев хлорид и 0,1 g калиев хлорид. Компонентите на мустаците се сменят и стерилизират под голям менгеме от 0,1 MPa с издърпване от 20 минути.

Среда за отглеждане на халофили. Vykoryvouyut zvichayny m'yasopeptoni с добавки от 10-15 до 20-30% кухненска сол. Освен това при приготвянето на живи мастни среди се добавя процент от агара. Стерилизацията се извършва под извънгабаритен менгеме от 0,1 MPa с издърпване от 20 минути.

Средата на обогатяването. Средата на Мюлер. До 4,5 g химически чист creedy, стерилизиран отпред на суха топлина, добавете 90 ml MPB и стерилизирайте при излишък от 0,1 MPa с издърпване от 20 минути. Приготвя се: а) дозиране на хипосулфит (50 g чист кристален хипосулфит се залива до 100 ml с дестилирана вода, стерилизира се с обикновена пара за 30 минути); б) дестилация на йод (20 g метален йод и 25 g калиев йодид се заливат до 100 ml с дестилирана вода). Преди сеитба стерилно добавете 10 ml хипосулфитен разтвор и 2 ml йоден разтвор към бульона с салфетка. При добавяне на съставка за кожа е необходим sumish. Изсипете в стерилни епруветки и колби.

Сряда Килиан. До 100 ml чист BCH, стерилно добавете 1 ml воден разтвор (1:1000) диамант зелено пред мустаците.

Здравите среди са в основата на бактериологичните изследвания. Вонята трябва да служи като визия на готовия материал от чисти култури от микроби, култивирането на техните сили. Върху животворните среди се създават оптималните умове за размножаване на микроорганизми. Към склада на средните части се включва речта, необходима за всички компоненти на цитоплазмата, tobto. всички dzherela растеж на жив организъм. Тук пред нас виждаме азота, въглищата, водата и киселата.

Джерело вода, която вкисна в средата на живата - вода. Dzherelom азот е органична половина, yakі otrimuyut z месо, ребра, плацента, мляко, яйца, кръв. В резултат на хидролиза с панкреатин или трипсин, т.нар. хидролизира, което ще отмъсти за големия брой аминокиселини и пептони, така че по-голямата част от микроорганизмите ще бъдат добре завладени. Нативният протеин е завладян от по-малко от същия микроорганизъм, който екзопротеазите могат. Хидролизатите са в основата на приготвянето на среди, богати на микроорганизми.

Dzherelom vugletsyu за патогенни микроби - основната разлика във въглехидратите: моно- и дизахариди, богати алкохоли, органични киселини и техните соли.

Кримските органогени, бактериите се нуждаят от неорганични вещества за защита на фосфор, калий, сяра, натрий, магнезий, цинк, както и микроелементи: кобалт, йод, манган, бор, цинк, молибден, мед и други.

Нуждите на микроорганизмите в неорганични почви се задоволяват с добавянето към животворната среда на KH2PO4 K2HPO4 и други соли. Такса от изброените органични елементи, много микроорганизми ще изисква растеж служители, tobto. в речи, като смърди не могат да се синтезират. При завършения вид към жилищните помещения трябва да се добавят увеличаващи се фактори. Към факторите на растежа има различни витамини, които са сърцевината на живота в средата на живота, които да добавят към животворната среда на продукта от растежа и пътуването на съществото, което е да отмъсти на никотин, пантотенова, парабензоена киселина, витамини А, В, С и в неговия склад.

Доживотната реч от микроби може да бъде завладяна само за пеещата реакция на средата, т.к. проникването в мембраните на микробния клитин се променя във времето на угара в зависимост от рН на средата.

Wimogi до средата на живота.

1. Животът на средата на вината и необходимия живот на микробите на живота на речта.

2. pH реакция на майката, оптимална за вида микроб, който расте. -

3. Живейте средата на виновната майка достатъчно влага и вискозитет, т.к. микробите са гладни за законите на дифузията и осмозата.

4. Изотоничност на майката и потенциал оксид-вода (gH2).

5. Чернодробните среди могат да бъдат стерилни, осигурявайки възможност за отглеждане на чисти култури.

Необходимостта от живи речи и физически умове при различните видове микроби не е еднаква и възможността за създаване на универсална животворна среда е изключена.

Според консистенцията разграничават малки и редки животворни среди. Schіlnі подготвят на базата на редки за допълнително добавяне към тях лепило речи: агар-агар или желатин! Агар-агар (на малайски – желе) е продукт от вегетационния период, получен от морски водорасли. Във вода агар-агарът се различава при температура 80-86°C, по-твърд е при 36-40°C и помага за укрепване на жизненоважни среди за култивиране на различни групи микроорганизми при оптимална за тях температура. .

Класификацията на живите среди се извършва за тяхното складиране и разпознаване

1. Според склада на жизнената среда се разделя на прост и сгъваем

Разграничаване на група медиуми на позорна изповед - най-простата. Към групата се добавят месо-пептонен бульон (обикновен жив бульон), месо-пептонен агар (обикновен жив агар), жив желатин. Ци медиите zastosovuyutsya расте богати на патогенни микроби. Средите на сакралното разпознаване или просто животворните среди се приготвят да звучат от хидролизатите с добавка на пептон и натриев хлорид. Их використ е и основа за приготвянето на сгъваеми ядра.

2. Другата група включва средните избираеми, специални и диференциално-диагностични.

Средните са избираеми (селективни, вибрационни, натрупани, обогатени). Принципът на създаване на селективни жизнени среди на основи за задоволяване на основните биохимични и енергийни нужди на този вид микроби, за чието отглеждане се разпознава вонята, или добавяне на инхибитори, които представляват растежа на супутнио микрофлората разглеждан. Pevny съхранение и концентрация на живи същества, микроелементи, растежни фактори при висока стойност на pH, или добавяне на ingibіtorіv, ще осигури оптималния ум за отглеждане на един или повече видове микроорганизми. Когато засадите върху тях материал, който ще отмъсти за сумата от различни микроби, ще видим растеж от този вид, за който средата ще бъде избирателна. Основната част на избираемата среда е жовтков бульон, селенитов бульон, средата на Плоскирева - за отглеждане на микроби от чревното семейство, басейн с пептонна вода - за холерен вибрион.

Жовтков бульон. Към MSL добавете 10-20% бичачо жовчи. Zhovch prinіchuє rіst kokіv и poіtryanoї flori, ейл е податлив на възпроизвеждане на салмонела.

Селенов бульон. Комбинира се с фосфатен бульон с добавка на натриева сол селенит, като инхибитор на растежа на какаовата флора, Escherichia coli, и не инхибира растежа на салмонела.

сряда Плоскирев. Силна средна позиция, която може да отмъсти за чревни коли, cokiv, но е по-благоприятна за растежа на шигел и салмонела, чието размножаване не се нарушава от диамантени зелени и жлъчни соли.

Пептонна вода. Намажете с 1% пептон и 0,5% натриев хлорид. Средата е селективна за хлорни вибрации, т.к вонята е по-вероятно да се размножават други бактерии в "гладната среда", особено при реакция на локви, която самите те виждат като кисели продукти на живота.

Специални медии. Необходим за култивиране на бактерии, които не виреят върху обикновени живи среди. За някои организми е необходимо да се добавят въглехидрати към прости живи среди, кръв и други живи същества. Бульон от обикновена жива среда - цукрови бульон и цукрови агар за стрептокок (пригответе се под формата на MPB и MPA, към които се добавя 0,5-2% глюкоза).

За пневмококи и менингококи специална среда е бульон от сива вълна и агар от сива вълна (за да приготвите бульон от сива вълна, смесете 1 част MPB с 2 части пресен сироворт, за дегустация на агар от сива вълна към разтопен MPA, добавете 10 -25% гръдна кост)

Диференциално-диагностични среди на викорен заместник според видовата принадлежност на изследвания микроб, в зависимост от особеностите на този обмен на речи. Според тяхното разпознаване, диференциално-диагностичните медии се подразделят, както следва:

1. Средата на проявата на протеолитична здатност на микробите, която е необходима за приемане на мляко, желатин, кръв и т.н. във вашия склад.

2. Среди с въглехидрати и богати на атомни алкохоли за

откриване на различни кукролитични ензими.

В склада на диференциално диагностични среди, които се използват за разкриване на цукролитични органи и оксидно-хидрични ензими, се въвеждат индикатори: неутрален червен, кисел фуксин, бромтимолово синьо, воден блакитен с еризипелна киселина (BP). Променяйки замърсяването си за различни стойности на pH, индикаторът показва наличието на ензима и разделянето на съставката, въведена в средата.

Приложете диференциално-диагностична среда:

Среден Ендо. Съхранява се с MPA с добавка на 1% лактоза и безнатриев натриев сулфит основен фуксин (индикатор). Средният Ендо има слаб цвят на еризипела. Vykoristovuetsya в диагностиката на чревни инфекции за диференциация на бактерии, така че лактозата се излага с приемането на киселинни продукти, под формата на бактерии, за да не се тревожи за здравето на населението. Колониите от микроби, носещи лактоза (чревни коли) имат червеникав цвят, наследен от фуксина. Колонии от лактозо-отрицателни микроорганизми - салмонел, шигел и ин-варварски.

Преди диференциално-диагностичните среди има къс и отворен ред струни. Вината са съставени от въглехидрати (Hissa средни), MSB, мляко, месо-пептонен желатин.

Средите на Gissa се приготвят на базата на пептонна вода, към която се добавят химически чисти моно-, ди- или полизахариди (глюкоза, лактоза, нишесте и др.).

Добавете индикатор, за да разкриете промяната в pH в резултат на усвояването на киселини и разграждането на въглехидратите. При дълбоко разделяне на въглехидратите, газоподобните продукти (CO2, CH4 и др.) се разтварят, те се улавят от допълнителни плувки - малки тръбички, спуснати до средата на дъното. Среди с въглехидрати могат да се приготвят и алкални - с добавяне на 0,5-1% към агар-агар. Тоди газификацията се хваща за затваряне на крушките (отваряне) в центъра на средата.

На BCH, които са включени в реда от линии, се разкриват продукти, които се разтварят при разлагане на аминокиселини и пептони (индол, сирводен). Околосветското плаване изглежда е път за въвеждане на MPB след засяване на културата от филтърна хартия, изтекла с октатно олово. С разделянето на аминокиселини, за да отмъсти на сърка, се вижда sirkovodny, papriets черен rahunok на приемането на сярно олово. За индикация на индол може да се използва индикатор за сгъване. Индолът се разтваря, когато триптофанът се разгради и може да бъде открит, когато се добави към култура, отглеждана с MPB, което е индикатор. За наличието на индол, MPB zabarvlyuetsya близо до зелените и синия цвят.

Суха среда.

Живият агар и навит основната диференциално-диагностична среда се освобождават като сухи препарати, които могат да използват небхидни складове. Преди такива прахове е необходимо да се добави още вода и да се вари, а след това, след като се налее, да се стерилизира.